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目的：
探讨视黄醇结合蛋白4（retinol binding protein4，RBP4）的基因rs3758539位点单核苷酸多态性和与子痫前期（Preeclampsia，PE）遗传易感性的关系，以此确定RBP4基因rs3758539位点是否为PE易感性基因位点，为临床预防及治疗子痫前期提供理论依据。初步探讨PE和正常孕妇RBP4水平、胎盘RBP4mRNA及蛋白表达水平的差异。
方法：
1.选取2015年1月至2019年12月期间山东青岛、烟台等多个地区三甲医院分娩的1176例PE孕妇作为病例组，选取1441例正常健康孕妇作为对照组，抽取外周静脉血3-5ml（EDTA抗凝），分离部分外周血提取DNA，采用Taqman探针实时荧光PCR技术检测RBP4基因rs3758539位点多态性。采用Sanger双脱氧链终止法对两组孕妇DNA进行测序以验证RBP4基因rs3758539位点的基因型。Hardy-Weinberg平衡检测群体遗传代表性。采用独立性t检验进行两组之间一般临床资料的差异比较，采用单因素方差分析进行多组间一般临床资料的差异比较；采用Pearson-χ2检验进行两组之间基因型及等位基因频率分布的差异比较；相对风险度用OR值和95%的可信区间来表示，当双侧P<0.05时表示有统计学意义。
2.采用随机抽样的方法随机抽取2018年9月-2019年12月期间入院39名正常分娩的健康孕妇以及确诊的32名PE患者，收集其外周血，分离血清。采用酶联免疫吸附法（Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）检测血清RBP4的水平；待分娩结束后，收集胎盘组织，提取RNA和蛋白。采用实时荧光定量PCR（Real-Time PCR）和蛋白印记法（Western Blotting，WB），检测胎盘组织RBP4的mRNA和蛋白表达水平。
结果：
1.Sanger测序结果与Taqman探针实时荧光PCR检测结果相符合。Hardy-Weinberg遗传平衡检测rs3758539位点（χ2=1.31，P=0.25），说明本实验研究对象具有良好的群体代表性。与对照组相比，PE患者的年龄、孕次和流产次数差异无显著性（P＞0.05）；但PE组收缩压（P＜0.001）和舒张压（P＜0.001）明显升高、分娩孕周明显提前（P＜0.001）、胎儿出生体重明显降低（P＜0.001）。病例组与对照组相比，RBP4基因rs3758539位点在基因型分布存在显著差异（χ2=10.38，P=0.006），等位基因频率无显著差异（χ2=0.93，P=0.34），GG基因型与（GA+AA）基因型相比无显著性差异（χ2=3.09，P=0.08）；AA基因型与（GG+GA）基因型相比具有显著差异（χ2=4.74，P=0.03）。早发型PE组与对照组比较，基因型分布具有显著差异（χ2=9.39，P=0.009），等位基因频率无显著差异（χ2=0.56，P=0.46）。晚发型PE组与对照组比较，基因型分布（χ2=4.45，P=0.11）和等位基因频率（χ2=0.64，P=0.43）均无显著性差异。轻度PE组与对照组相比较，基因型分布（χ2=2.36，P=0.31）和等位基因频率（χ2=0.09，P=0.77）均无显著性差异；重度PE组与对照组相比较，该位点的基因型分布差异具有显著性（χ2=10.85，P=0.004），等位基因频率差异无显著性（χ2=1.57，P=0.21）。
2.正常孕妇和PE患者BMI、血清丙氨酸氨基转移酶（Alanine Aminotransferase，ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（Aspartate Aminotransferase，AST）、RBP4水平无显著差异（P＞0.05）；正常孕妇和PE患者胎盘RBP4mRNA表达无显著性差异（P＞0.05）；但PE患者胎盘RBP4蛋白表达显著升高（P＜0.05）。
结论：
1、在山东地区汉族孕妇人群中RBP4基因rs3758539位点多态性与PE的发生可能存在关联。在山东地区汉族孕妇人群中RBP4基因rs3758539位点多态性可能与早发型PE、重度PE的发生可能存在关联。
2、胎盘RBP4蛋白表达水平可能与PE发病有关。
探讨视黄醇结合蛋白4（retinol binding protein4，RBP4）的基因rs3758539位点单核苷酸多态性和与子痫前期（Preeclampsia，PE）遗传易感性的关系，以此确定RBP4基因rs3758539位点是否为PE易感性基因位点，为临床预防及治疗子痫前期提供理论依据。初步探讨PE和正常孕妇RBP4水平、胎盘RBP4mRNA及蛋白表达水平的差异。
方法：
1.选取2015年1月至2019年12月期间山东青岛、烟台等多个地区三甲医院分娩的1176例PE孕妇作为病例组，选取1441例正常健康孕妇作为对照组，抽取外周静脉血3-5ml（EDTA抗凝），分离部分外周血提取DNA，采用Taqman探针实时荧光PCR技术检测RBP4基因rs3758539位点多态性。采用Sanger双脱氧链终止法对两组孕妇DNA进行测序以验证RBP4基因rs3758539位点的基因型。Hardy-Weinberg平衡检测群体遗传代表性。采用独立性t检验进行两组之间一般临床资料的差异比较，采用单因素方差分析进行多组间一般临床资料的差异比较；采用Pearson-χ2检验进行两组之间基因型及等位基因频率分布的差异比较；相对风险度用OR值和95%的可信区间来表示，当双侧P<0.05时表示有统计学意义。
2.采用随机抽样的方法随机抽取2018年9月-2019年12月期间入院39名正常分娩的健康孕妇以及确诊的32名PE患者，收集其外周血，分离血清。采用酶联免疫吸附法（Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）检测血清RBP4的水平；待分娩结束后，收集胎盘组织，提取RNA和蛋白。采用实时荧光定量PCR（Real-Time PCR）和蛋白印记法（Western Blotting，WB），检测胎盘组织RBP4的mRNA和蛋白表达水平。
结果：
1.Sanger测序结果与Taqman探针实时荧光PCR检测结果相符合。Hardy-Weinberg遗传平衡检测rs3758539位点（χ2=1.31，P=0.25），说明本实验研究对象具有良好的群体代表性。与对照组相比，PE患者的年龄、孕次和流产次数差异无显著性（P＞0.05）；但PE组收缩压（P＜0.001）和舒张压（P＜0.001）明显升高、分娩孕周明显提前（P＜0.001）、胎儿出生体重明显降低（P＜0.001）。病例组与对照组相比，RBP4基因rs3758539位点在基因型分布存在显著差异（χ2=10.38，P=0.006），等位基因频率无显著差异（χ2=0.93，P=0.34），GG基因型与（GA+AA）基因型相比无显著性差异（χ2=3.09，P=0.08）；AA基因型与（GG+GA）基因型相比具有显著差异（χ2=4.74，P=0.03）。早发型PE组与对照组比较，基因型分布具有显著差异（χ2=9.39，P=0.009），等位基因频率无显著差异（χ2=0.56，P=0.46）。晚发型PE组与对照组比较，基因型分布（χ2=4.45，P=0.11）和等位基因频率（χ2=0.64，P=0.43）均无显著性差异。轻度PE组与对照组相比较，基因型分布（χ2=2.36，P=0.31）和等位基因频率（χ2=0.09，P=0.77）均无显著性差异；重度PE组与对照组相比较，该位点的基因型分布差异具有显著性（χ2=10.85，P=0.004），等位基因频率差异无显著性（χ2=1.57，P=0.21）。
2.正常孕妇和PE患者BMI、血清丙氨酸氨基转移酶（Alanine Aminotransferase，ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（Aspartate Aminotransferase，AST）、RBP4水平无显著差异（P＞0.05）；正常孕妇和PE患者胎盘RBP4mRNA表达无显著性差异（P＞0.05）；但PE患者胎盘RBP4蛋白表达显著升高（P＜0.05）。
结论：
1、在山东地区汉族孕妇人群中RBP4基因rs3758539位点多态性与PE的发生可能存在关联。在山东地区汉族孕妇人群中RBP4基因rs3758539位点多态性可能与早发型PE、重度PE的发生可能存在关联。
2、胎盘RBP4蛋白表达水平可能与PE发病有关。