禽流感是由禽流感病毒感染家禽后引起的各种综合征,对家禽业和人类公共卫生都有巨大威胁。近年来,H9N2亚型禽流感病毒在我国多个省区均时有流行,在临床上引起鸡群的呼吸道症状、产蛋下降、不同程度的发病率和致死率,对我国养禽业造成了严重危害。对禽流感病毒的快速检测是制定并落实禽流感防控措施的前提。　　 本研究建立了基于H9亚型禽流感病毒单克隆抗体的ELISA和电化学发光免疫检测方法。首先制备抗H9亚型禽流感病毒的单克隆抗体和兔多克隆抗体,建立双抗体夹心ELISA检测方法,检测临界值为0.369,可疑区间为0.287-0.451;阴性和阳性变异系数分别为1.95％和4.70%,均小于10%;检测限为104.5EID50。　　 在建立电化学发光免疫检测方法时,先将单克隆抗体和多克隆分别进行钌联吡啶和生物素标记。接着将抗原或待测样品先与标记了钌联吡啶的单克隆抗体反应,再将此抗原-抗体复合物与通过生物素-链霉亲和素系统固定在磁微球表面的兔多克隆抗体结合,充分反应后,除去游离物质。用检测缓冲液重悬磁微球,加入反应底物三丙胺后即可在电化学分析系统进行发光的检测。该方法的检测临界值为28.3,可疑区间为23.4-33.2;阴性和阳性变异系数分别为8.8%和9.8%,均小于10%;检测限为2.5×105.5.5EID50。　　 两种检测方法在检测其他亚型AIV和其他种类禽源病毒时均为阴性结果,检测的20株H9亚型AIV不同分离株均为阳性结果。用此两种方法检测了88份临床采集的鸡咽肛棉拭子,与鸡胚分离法的符合率分别为90.5%、82.5%;此二种方法的符合率为91.2%。电化学方法免疫检测方法检测时间短,3个小时内即可完成,但敏感性略低于ELISA方法。