目的：　　 研究ntegrin-linkedkinase(ILK)在胰腺癌中的表达情况及其与临床病理特征的关系及其对胰腺癌细胞(Panc-1)增殖、迁移、侵袭等生物学行为的影响。　　 材料及方法：　　 61例胰腺癌标本取自中国医科大学附属第一医院2005年1月至2009年12月收治并行手术切除治疗的原发性胰腺癌标本,其中男性39例,女性22例;男女比例1.77:1,年龄39-74岁,平均57.8岁。肿瘤位于胰头49例,胰体尾12例。所有病例均经术中及术后病理证实诊断为胰腺导管腺癌,术前未行放疗及化疗。另取可利用的配对胰腺癌旁组织26例及4例正常胰腺组织(胰腺良性肿瘤手术时所取正常胰腺组织)作为对照。免疫组织化学方法检测61例胰腺癌标本,26例癌旁组织,4例正常胰腺组织中ILK蛋白的表达情况,并统计分析其表达率与临床病理学特征的相关性。构建RNA干扰ILK基因的慢病毒载体并感染胰腺癌细胞(Panc-1),通过Q-PCR和WB检测验证其干扰有效性。通过transwell方法检测Panc-1细胞侵袭情况,Westernblot检测EMT标志蛋白E-cadherin的表达情况。MTT法检测Panc-1细胞的增值情况及流失细胞仪检测各组细胞的细胞周期变化情况。　　 结果：　　 免疫组织化学染色示ILK蛋白定位于细胞浆,61例胰腺癌组织中有40例阳性表达,表达率为65.6%,其中7例Ⅲ期胰腺癌中有6例ILK染色强度均呈(+++);26例癌旁组织中有3例阳性表达,表达率11.5%;4例正常胰腺组织未见ILK的表达,胰腺癌组纵的ILK表达明显高于可配对癌旁组织(p＜0.05)及正常胰腺组织(p＜0.01)。ILK高表达与胰腺癌患者病理类型中的分化程度无关,而与肿瘤的淋巴结转移、临床分期密切相关(P＜0.05)。成功构建RNA干扰ILK基因的慢病毒载体并感染胰腺癌细胞(Panc-1),确定其干扰的有效性,为后续试验奠定基础。转染后的MTT检测结果显示KD组(实验组)细胞较NC组(对照组)相比,在转染24小时后增殖活性无明显差异,而在转染后48h、72h、96h增殖则受到了明显的抑制且抑制趋势逐渐增强,转染后48后KD组(实验组)细胞较NC组(对照组)增殖受到抑制,差异显著(p＜0.05),而转染72、96小时后KD组较NC组比较增殖受到了更为明显的抑制,差异更加显著(p＜0.01)。流式细胞术检测结果表明:KD组细胞对比NC组细胞引起了明显的G0/G1期停止,G2/M期细胞明显减少(P＜0.01)。siRNA慢病毒转染对Panc-1细胞迁移、侵袭实验结果显示基因沉默ILK后胰腺癌细胞的迁移能力、侵袭能力受到了明显的抑制,迁移侵袭的细胞数减少。其中KD组的迁移率比较NC组,具有明显的差异(p＜0.01),而KD组的侵袭率比较NC组也有显著的差异(p＜0.05)9NC组为阴性对照,以GAPDH为内参,采用WesternBlot检测NC、KD组细胞的E-cadherin蛋白表达情况。SDS-PAGE凝胶电泳显示E-cadherin的条带为120-135KD,GAPDH为36KD的条带。实验结果表明siRNA慢病毒转染Pane-1细胞后KD组E-cadherin表达较NC组明显上调(p＜0.01)。　　 结论：　　 ILK在胰腺癌组织中有较高的阳性表达率,并与淋巴结转移及临床分期相关,与分化程度无关。慢病毒介导的RNA干扰ILK基因转染Panc-1细胞后其增值、迁移、侵袭能力明显降低,细胞停滞在G0-G1期,EMT标志蛋白E-cadherin的表达也明显增高,逆转了EMT的发生。