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Innexin2(Inx2)和Innexin3(Inx3)属于gap junction蛋白家族，前期研究表明，Inx2和Inx3促进细胞凋亡与PI3K/Akt信号通路磷酸化相关，但Inx2和Inx3是如何通过调控PI3K/Akt信号通路来促进细胞凋亡的机理尚不清楚。在本研究中，我们通过RNAi分别沉默表达了Inx2、Inx3的Hi5稳定表达细胞系中Akt和p85α，进行p-Akt及caspase3的Western blot检测，发现Akt或p85α的沉默都能导致p-Akt相应减弱，且稳定表达细胞系出现凋亡。同时利用Bac-to-Bac表达系统在Sf9细胞中异位表达了Inx2、Inx3，进行了western blot检测，发现Sf9细胞被重组杆状病毒感染后，均出现了细胞凋亡，其中Bac-Inx3感染的Sf9细胞的凋亡程度最明显，Bac-Inx2的最弱;在p-Akt的检测中则是Bac-Inx3最弱， Bac-Inx2的最强。已有研究证实，杆状病毒本身在感染昆虫细胞时具有磷酸化Akt，抑制细胞凋亡的作用。这些结果表明在利用Bac-to-Bac表达系统在Sf9细胞异位表达Inx2和Inx3时，Inx2和Inx3具有抑制Akt磷酸化，进而促进细胞凋亡的作用，但这种作用又受到了杆状病毒抗凋亡作用的拮抗。以上结果提示，在Bac感染细胞时会启动PI3K/Akt信号通路中Akt磷酸化的背景下，利用重组Bac在Sf9细胞中表达目的基因时，Inx3对Akt的去磷酸化作用强于Bac对Akt的磷酸化作用，最终促进细胞凋亡;Inx2对Akt的去磷酸化作用弱于Bac对Akt的磷酸化作用，最终细胞凋亡被减弱;Inx2和Inx3的去磷酸化作用存在差异。亚细胞定位发现Inx2和Inx3存在磷酸化修饰的差异性，Inx3被磷酸化，且被磷酸化的蛋白分布在细胞膜和细胞质，没有被磷酸化的蛋白分布在细胞核，而Inx2则没有磷酸化修饰。深入的dye uptake实验发现感染Bac-Inx2和Bac-Inx3的细胞表面hemichannel的通透性发生了变化，Bac、Bac-inx2、Bac-inx3感染Sf9细胞24 h后与正常Sf9细胞相比， PI弥散入细胞的程度均依次减弱。但是，Inx2和Inx3抑制Akt的磷酸化作用是通过改变hemichannel的通透性来进行还是基因本身的作用还需要进一步研究证实。