咪唑类物质KK-42对日本沼虾表皮结构的影响

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日本沼虾(Macrobrachium nipponense)是我国重要的淡水养殖经济虾类。我们实验室首次研究发现用咪唑类物质KK-42处理日本沼虾的幼虾,可以显著促进其生长,缩短蜕皮周期,但作用机制尚未弄清。新旧表皮的更替是蜕皮的重要事件,本文从组织学水平研究了幼虾头胸甲和腹部表皮的外骨骼结构以及KK-42的影响;用紫外吸收法,定量分析了日本沼虾体内参与蜕皮的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)在KK-42处理后不同时间的活力。将体长为3.5-5.0cm的日本沼虾随机分为2组,即处理组和对照组。处理组用1.95×10-4mol/L的KK-42溶液浸泡处理1min,对照组用不含有KK-42的溶液处理,常规饲养。选取处于蜕皮前晚期(D3)的虾于处理后1、3、5、7、9d做头胸甲和腹部外骨骼的组织学观察,测量外骨骼各层的厚度;选取处于蜕皮前期(D0-4)的日本沼虾,取其肝胰腺测定NAGase在处理后0、6、12、24h的活力;选取处于各个时期未经处理的日本沼虾做头胸甲的组织学观察,实验均设置3个重复。结果如下:日本沼虾表皮自外而内分为两层,即外骨骼和上皮细胞层。蜕皮间期日本沼虾头胸甲外骨骼自外而内分为3层:上表皮、外表皮和内表皮。PAS和苏木精染色显示:上表皮最薄,约占外骨骼厚度的1/9-1/10,为红色匀质结构;外表皮较厚,约占整个外骨骼厚度的2/5-1/2,为紫红色的层状结构;内表皮最厚,约占整个外骨骼厚度的1/2-3/5,为粉红色的疏松结构。并且上表皮和外表皮在蜕皮前期形成,内表皮在蜕皮后形成。日本沼虾上皮细胞的高度在蜕皮周期也是不断变化的:蜕皮间期的细胞高度最低;蜕皮前期细胞高度最高,尤其是D2期细胞达最高;而在蜕皮后期的A和B期,高度次之。KK-42处理后第1天,头胸甲外表皮厚度与对照组相比显著增长,提高了42.83%(P<0.05);第3天和第9天,头胸甲内表皮的厚度比对照组提高了70.72%(P<0.01)、77.27%(P<0.01),同时,整个头胸甲的厚度比对照组增加了38.69%(P<0.01)、52.23%(P<0.01)。腹部外骨骼的厚度变化不是很明显:处理后第1天,其外表皮厚度比对照组增加了21.26%(P<0.05);在第9天,其总厚度比对照组提高了14.59%(P<0.05)。KK-42处理后第3天,上皮细胞的高度比对照组提高了31.69%(P<0.05)。对照组肝胰腺NAGase活性呈波动性变化,其活力在6、12、24h与0h相比明显降低。KK-42处理后6、12和24h, NAGase活力显著增高,分别比相应的对照组提高了48.33%(P<0.01)、53.78%(P<0.01)、90.28%(P<0.01)。结论:KK-42对日本沼虾的头胸甲和腹部表皮的厚度有显著的促进作用,尤其是头胸甲的内表皮厚度;并显著提高肝胰腺NAGase活力。
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