【摘 要】
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在分析鸭瘟病毒gB蛋白抗原性的基础上，设计一对引物克隆gB蛋白中部抗原性较好的抗原域编码基因,定向克隆至表达载体pET32a中,构建了原核表达质粒pET-gB2。将pET-gB2转化至感受
【机 构】
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南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室, 江苏南京 210095
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会教学专业委员会第六届第12次学术研讨会
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在分析鸭瘟病毒gB蛋白抗原性的基础上，设计一对引物克隆gB蛋白中部抗原性较好的抗原域编码基因,定向克隆至表达载体pET32a中,构建了原核表达质粒pET-gB2。将pET-gB2转化至感受态E.coli BL21(DE3) 中,经IPTG诱导和SDS-PAGE 分析,可见约54.6kDa的目的蛋白以包涵体形式表达。Western blotting 分析发现,表达产物与抗鸭瘟的鼠阳性血清发生特异性反应。将包涵体溶解于8mol/L的尿素中,利用His×Bind试剂盒获得纯化的蛋白,将纯化的蛋白皮下注射免疫小鼠,间接ELISA法测得抗体的效价，MTT法检测免疫小鼠的T淋巴细胞增殖反应能力。结果说明该融合蛋白能够诱导机体产生较强的体液免疫和细胞免疫。
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