目的:运用血管介入插管技术,经犬肾动脉快速注射含人肝细胞生长因子(HGF)重组基因的质粒(pCMV-HGF)。检测不同时间犬肾脏组织中外源性人HGF蛋白的水平,探讨了解外源性HGF基因在犬肾脏组织内的表达情况。 方法:健康成年犬6只,在麻醉和无菌条件下均经肾动脉介入插管。其中4只注射pCMV-HGF质粒,1只注射对照空质粒(pcDNA3)。1只注射等渗盐水为无质粒空白对照。应用抗人HGF单克隆和多克隆抗体,建立检测人重组HGF的酶联免疫检测(ELISA)系统。注射后不同时间留取犬静脉血以及部分肾组织,采用ELISA方法,分别检测血清及肾组织中人HGF蛋白的水平。 结果:(1)本实验建立的检测人重组HGF的FLISA敏感性高(15～1000ng/ml),重复性强(＞98％);(2)接受3种不同处理的犬静脉血中均未检测到人重组HGF蛋白的存在;(3)注射pCMV-HGF质粒的犬肾组织中能够检测到人重组HGF蛋白的存在。以注射质粒8小时的水平最高。72小时仍能检测到该生长因子的存在。注射空质粒和等渗盐水的犬肾组织则无表达。 结论:运用血管介入插管技术,经犬肾动脉快速注射含人肝细胞生长因子(HGF)重组基因的质粒(pCMV-HGF)可以在肾脏内产生基因高转染表达。