【摘 要】
：
目的：克隆与表达结核分枝杆菌蛋白Rv0341并对其免疫反应性进行研究。方法：利用聚合酶链式反应自结核分枝杆菌标准菌株HRv扩增Rv0341编码基因,克隆于pET-22b表达载体,测序证实后
【机 构】
：
重庆市肺科医院结核基因诊断中心实验室
【出 处】
：
第三次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会
论文部分内容阅读
目的：克隆与表达结核分枝杆菌蛋白Rv0341并对其免疫反应性进行研究。方法：利用聚合酶链式反应自结核分枝杆菌标准菌株H<,37>Rv扩增Rv0341编码基因,克隆于pET-22b表达载体,测序证实后转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE、快速免疫金渗滤法(DIGFA)鉴定目的蛋白表达和免疫反应性。结果：成功克隆了1440bp的表达Rv0341蛋白的全长基因,测序结果与GeneBank公布序列相符,IPTG诱导后表达出了约43KD的目的蛋白。以重组蛋白作为抗原进行DIGFA免疫反应,其与依R菌肺结核患者血清呈现强阳性反应,而不与非依R菌肺结核患者血清反应。结论：克隆表达了具有特异免疫反应性的Rv0341蛋白,为依R菌结核病临床血清学快速诊断方法的建立和试剂盒的研发奠定了基础。
其他文献
随着分子生物学等学科的迅速发展,新疫苗在不断研制和开发。 但是随着疫苗品种的增多和接种次数的增加,给婴儿、家长/监护人及医护人员带来许多不便,增加了疫苗使用和管理
目的：为了提高结核病诊断试剂的特异性和敏感性,构建了结核分支杆菌融合抗原38-6-10(38kD、ESAT-6和CFP10),并采用双抗原夹心ELISA方法初步分析了该融合抗原的抗原性。方法：通
本文在大肠杆菌中表达了白喉毒素(DT)全长片段。利用阴离子交换柱和分子筛进行纯化,得到了较纯的DT片段。并利用定点突变的方法,在DT的A片段的活性位点区域进行单点突变及双
目的：为了解温州市健康人群脑膜炎奈瑟菌带菌率(Nm)和血清抗体水平,及时对流行性脑脊髓膜炎(流脑)疫情进行预警和预测。方法：按照整群分层随机抽样的原则,选择温州市鹿城区、瓯
用PCR、琼扩和REA三种方法,对澳大利亚一鸡场2002年6月爆发的禽霍乱进行了诊断,结果表明,这次爆发系由血清4型多杀性巴氏杆菌所致。与1994年在该鸡场分离到的11株多杀性巴氏
目的：应用蛋白G吸附法,建立了一种梅毒特异性IgM抗体检测的新方法。方法：以蛋白G为吸附剂,结合TPPA的检测方法,对梅毒特异性IgM抗体进行检测;应用该方法对99例梅毒总抗体阳性的
2005年6月1日至24日期间,天津市武清区汉沽港镇发生一起由于生活饮用水源生物性污染导致的急性细菌性痢疾的爆发流行,共确诊病人1189例,罹患率为3.66％(1189/32505)。根据疾病
肠出血性大肠杆菌O157:H7是肠出血性生大肠杆菌(EHEC)的典型菌株,能产生致死性志贺毒素( Stx),引发溶血性尿毒综合症(HUS)等严重并发症,致死率达5~10％,其感染已经成为全球公共
目的 将外源蛋白或抗原稳定表达展示于大肠杆菌的外膜上.方法 应用大肠杆菌DY330介导的重组工程系统和kan/sacB无痕迹修饰技术,将长度为1653 bp的荧光素酶报告基因(luc)敲入D
目的：通过基因工程技术制备梅毒螺旋体重组外膜蛋白抗原TP17、TP0453,探讨其在梅毒血清诊断中的价值,为研制新型梅毒酶联免疫诊断试剂盒提供理论依据和实验数据。方法：PCR法扩