【摘 要】
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[目的]建立快速检测产志贺毒素大肠杆菌的四重PCR。 [方法]以灭活O157:H7 sakai株培养物作阳性模板,针对产志贺毒素大肠杆菌的特有的毒力基因stx1和stx2及与其致病性密切相
【机 构】
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西南民族大学生命科学与技术学院 四川成都610041
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会成立大会暨第一次学术研讨会
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[目的]建立快速检测产志贺毒素大肠杆菌的四重PCR。
[方法]以灭活O157:H7 sakai株培养物作阳性模板,针对产志贺毒素大肠杆菌的特有的毒力基因stx1和stx2及与其致病性密切相关的毒力基因hlyA和eaeA,参照相关文献,根据多重PCR反应原则设计了4对引物,并对PCR反应条件进行优化,检测其特异性和灵敏性。
[结果]该方法可扩增得到4条片段。分别为602bp、780bp、319bp和1110bp,与预期stx1、stx2、hlyA和eaeA目的片段大小相符,经克隆测序后与GenBank中序列比对分析同源性为100%。该方法特异性好,只对产志贺氏毒素大肠杆菌呈阳性扩增,不扩增其它无关病原菌,最低可检测0.96fg的细菌DNA模板。
[结论]成功的建立了检测产志贺毒素大肠杆菌的四重PCR,可用于STEC的快速检测及流行病学调查。
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