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采用高效液相色谱二极管阵列检测法，建立了同时测定马尾松针中花旗松素和芦丁含量的方法。采用C18 柱（250 mm ×4.6 mm，5 μm）；以甲醇：1％冰醋酸溶液为流动相进行梯度洗脱；检测波长：花旗松素为290nm，芦丁为359nm；柱温为30 ℃。实验结果表明，花旗松素和芦丁质量浓度分别为0.040～0.320 mg /L 、0.005～0.040 mg /L 时与其峰面积呈良好的线性关系(线性相关系数均为0.9999)；花旗松素和芦丁平均回收率(n=9)分别为100.42 ％和100.48 ％，相对标准偏差(RSD)分别为1.63 ％和2.62 ％。该方法是一种快速、灵敏、准确的分析方法，可以为马尾松针及其制剂的质量控制提供科学依据。