【摘 要】
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高分辨率熔解曲线(high resolution melting,HRM)是一种主要用于基因分型和突变扫描的分子诊断技术,在中药真伪鉴定中有着广泛应用前景。文章将高分辨率熔解曲线技术应用于鹿
【机 构】
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中国中医科学院中药资源中心道地药材国家重点实验室培育基地,安徽中医药大学,
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高分辨率熔解曲线(high resolution melting,HRM)是一种主要用于基因分型和突变扫描的分子诊断技术,在中药真伪鉴定中有着广泛应用前景。文章将高分辨率熔解曲线技术应用于鹿茸真伪鉴别,利用COⅠ序列,在退火温度为60℃,45个循环数的条件下,建立正品鹿茸药材熔解曲线模型,并筛选确定其DNA模板浓度、引物浓度、Mg2+浓度的适宜范围。结果表明,鹿茸药材在模板DNA质量浓度为10~100 mg·L-1、引物浓度0.2μmol·L-1,Mg2+浓度2.0 mmol·L-1的条件下,梅花鹿熔解曲线为双峰,其Tm分别为(81.96±0.07),(84.51±0.03)℃;马鹿熔解曲线为双峰,其Tm为(82.58±0.13),(85.95±0.05)℃。该方法可以实现简单、快速、高通量、可视化的鹿茸药材真伪鉴定。
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