【摘 要】
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目的 建立免疫学快速检测动物制品中的环丙沙星、恩诺沙星、磺胺二甲嘧啶残留,制备融合表达蛋白并进行评价.方法 利用传统单克隆抗体制备方法分别制备环丙沙星、恩诺沙星、磺
【机 构】
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邢台市食品药品检验所,邢台 054000;河北科技大学生物科学与工程学院,石家庄 050018
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目的 建立免疫学快速检测动物制品中的环丙沙星、恩诺沙星、磺胺二甲嘧啶残留,制备融合表达蛋白并进行评价.方法 利用传统单克隆抗体制备方法分别制备环丙沙星、恩诺沙星、磺胺二甲嘧啶的单克隆抗体,通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)获得3种单抗的单链抗体(single-chain variable fragment,Sc-Fv),再通过套嵌PCR方法,使用柔性氨基酸Linker将已获得的单链抗体进行串联并通过分子生物学技术获得高效融合表达,以纯化的多联融合单链抗体为探针,结合前期技术建立的免疫学快速检测技术,对融合表达产物的抗原特性进行初步的分析.结果 制备的单克隆抗体抗原抗体反应性良好,效价较高,融合表达抗体蛋白能够很好的与3种相应药物反应.结论 本研究初步建立了特异性较高的3种药物的融合表达抗体的制备方法,且该抗体具有良好的反应原性.
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