【摘 要】
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目的 应用环介导等温扩增(LAMP)技术建立新型布尼亚病毒(SFTSV)可视化快速检测方法. 方法 针对新型布尼亚病毒的S片段基因设计LAMP引物建立LAMP方法.反应体系内加入染料羟基
【机 构】
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南京军区疾病预防控制中心,江苏南京,210002
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目的 应用环介导等温扩增(LAMP)技术建立新型布尼亚病毒(SFTSV)可视化快速检测方法. 方法 针对新型布尼亚病毒的S片段基因设计LAMP引物建立LAMP方法.反应体系内加入染料羟基萘酚蓝(HNB)作为反应扩增指示剂,根据LAMP浊度仪扩增结果优化反应条件,根据HNB颜色变化进行结果判定,评估LAMP方法的特异性和灵敏性. 结果 建立的LAMP方法最低检出限为10拷贝/反应管;方法的特异性高,仅SFTSV反应管颜色由紫罗兰变为天蓝色,而汉坦病毒、新疆出血热、Q热、马尔堡、埃博拉病毒及阴性对照反应管均未发生变色反应;LAMP反应的最佳温度为63 ℃,其扩增效率高于常规PCR,试验过程仅需30 min. 结论 建立的可视化SFTSV LAMP检测方法具有特异性强,灵敏性高,实验设备要求简单等优点,可用于SFTSV的快速检测.
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