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目的 观察双酚A (BPA)对体外大鼠睾丸支持细胞增殖能力与闭锁蛋白Occludin (OCLN)表达的影响,探讨BPA对精子发生的损伤机制.方法 体外分离培养雄性Wistar大鼠睾丸支持细胞,油红O染色鉴定.实验分为BPA染毒组(25 μM、50 μM和100 μM分别处理细胞24h)、溶剂对照组(无血清DMEM/F12+DMSO+细胞悬液)和空白对照组(无血清DMEM/F 12).CCK-8法测支持细胞增殖活性,Western Blot法检测OCLN表达水平.结果 分离培养大鼠睾丸支持细胞纯度>90%.CCK-8实验结果显示:BPA对支持细胞增殖活性具有抑制作用,BPA浓度>103μM时,存活率明显降低,细胞存活率<44%,其差异有统计学意义(P<0.05).Western Blot法检测结果显示,OCLN蛋白表达随着BPA染毒剂量的增加而降低,呈剂量依赖性,不同染毒剂量组与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 BPA可抑制睾丸支持细胞增殖活性和OCLN的表达,干扰支持细胞正常的生精过程.