【摘 要】
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目的探讨低强度脉冲超声（LIPUS）对跟腱损伤小鼠疼痛步态的影响及可能机制。方法选取雄性C57BL/6小鼠，采用手术法全层离断右侧跟腱，建立跟腱损伤小鼠模型，按照随机数字表法分为跟腱损伤组和跟腱损伤+LIPUS组，每组7只。术后14 d使用Catwalk步态系统分析足印面积、站立时间、步行周期、脚爪最大强度及步幅5个参数评价小鼠步态功能变化。采用HE染色法观察各组小鼠跟腱组织形态学改变。采用免疫荧
【机 构】
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重庆医科大学附属第一医院康复医学科 400010,重庆医科大学附属第一医院康复医学科 400010,陆军军医大学大坪医院骨质疏松与骨发育中心，战伤组织修复与康复医学研究室，全军军事训练伤防治与康复实验
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目的探讨低强度脉冲超声（LIPUS）对跟腱损伤小鼠疼痛步态的影响及可能机制。
方法选取雄性C57BL/6小鼠，采用手术法全层离断右侧跟腱，建立跟腱损伤小鼠模型，按照随机数字表法分为跟腱损伤组和跟腱损伤+LIPUS组，每组7只。术后14 d使用Catwalk步态系统分析足印面积、站立时间、步行周期、脚爪最大强度及步幅5个参数评价小鼠步态功能变化。采用HE染色法观察各组小鼠跟腱组织形态学改变。采用免疫荧光染色法检测各组小鼠跟腱组织内诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的表达水平。同时在体外分离并培养小鼠跟腱细胞，使用100 ng/ml脂多糖（LPS）诱导细胞12 h建立体外细胞模型（LPS组）；并对细胞行LIPUS处理（LPS+LIPUS组）；同时设置对照组（未做任何处理）。采用免疫荧光染色检测细胞内核因子-κB（NF-κB）p65核转位情况，Western blot检测iNOS和磷酸化（p）-NF-κB p65蛋白的表达。
结果术后14 d，跟腱损伤+LIPUS组患肢足印面积［（0.28±0.13）cm2］大于跟腱损伤组［（0.14±0.10）cm2］（P<0.05），患肢站立时间［（0.21±0.03）s］长于跟腱损伤组［（0.11±0.04）s］（P<0.05），步行周期［（0.40±0.05）s］较跟腱损伤组［（0.25±0.05）s］显著延长（P<0.05），患肢脚爪最大强度和步幅与跟腱损伤组差异无统计学意义（P>0.05）。HE染色结果显示，跟腱损伤组跟腱组织增生明显，纤维结构排列疏松且无序，并伴有新生血管生成和炎细胞浸润；跟腱损伤+LIPUS组跟腱组织纤维结构排列较整齐，且新生血管和炎细胞浸润程度均有所减轻。术后14 d跟腱损伤+LIPUS组iNOS表达量［（2.84±0.94）%］低于跟腱损伤组［（5.70±0.81）%］（P<0.05）。小鼠跟腱细胞免疫荧光结果表明，与对照组相比，LPS组细胞内NF-κB p65蛋白转位入核，经LIPUS处理后可抑制NF-κB p65蛋白的核转位。Western blot检测发现，对照组跟腱细胞不表达iNOS，p-NF-κB p65蛋白表达量为（0.63±0.16）；与对照组相比，LPS组细胞iNOS（0.99±0.22）和p-NF-κB p65（1.02±0.19）蛋白表达水平显著升高（P<0.05），LPS+LIPUS组iNOS（0.62±0.10）和p-NF-κB p65（0.65±0.21）蛋白表达水平较LPS组显著降低（P<0.05）。
结论LIPUS治疗可改善跟腱损伤小鼠步态功能并抑制体内和体外iNOS的表达，该作用可能与LIPUS抑制NF-κB信号通路有关。
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