反义寡核柑酸逆转卵巢癌耐药细胞株SKOV3/mdr1耐药性的体外研究(英文)

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目的 研究针对MDR1基因的反义寡核柑酸对卵巢癌耐药细胞株SKOV3/mdr1耐药性的逆转作用。方法 将MDR1基因导入卵巢癌细胞株SKOV3作为耐药细胞的模型 ,命名为SKOV3/mdr1。以脂质体lipofectamine介导将MDR1基因的反义寡核柑酸导入SKOV3/mdr1,同样将正义寡核柑酸导入上述细胞为对照。利用反转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测细胞内MDR1基因mRNA的量。MDR1基因表达的产物P糖蛋白及其功能分别以流式细胞仪及罗丹明 12 3排出实验检测。细胞的耐药性由MTT实验及细胞集落培养来检测。结果 经MDR1基因的反义寡核柑酸转染后 ,SKOV3/mdr1细胞内MDR1基因mRNA的量降至内对照β actinmRNA的 60 %。P糖蛋白阳性细胞的相对百分数由 10 0 %降至 5 2 6% (P <0 0 1)。细胞内罗丹明 12 3由9 1增至 33 8% ,对泰素的耐药性降至SKOV3/mdr1细胞的 5 8%。与SKOV3/mdr1细胞相比 ,在特定的药物浓度范围内 ,经MDR1基因的反义寡核柑酸转染后 ,SKOV3/mdr1细胞较未转染细胞对泰素和阿霉素的抗性细胞集落分别减少了 8 6± 0 8和 3 1± 0 6倍。结论 SKOV3/mdr1细胞经MDR1基因的反义寡核柑酸转染后部分抑制了MDR1基因在mRNA水平的转录及在蛋白水平的表达 ,从而增加了该细胞对化疗的敏感性。
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