环丙沙星衍生物的制备及其抗体特异性研究

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本文研究了环丙沙星(CPLX)羧基衍生物及其抗体的制备,并对该衍生物抗体的特异性进行了测定。将环丙沙星与3-溴丙酸反应,生成环丙沙星的羧基衍生物(CPLX-COOH),通过制备液相进行纯化,用红外光谱(IR)、电喷雾电离质谱(ESI-MS)与核磁共振法(NMR)进行鉴定;将环丙沙星衍生物分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)进行偶联,分别制备免疫抗原(CPLX-COOH-BSA)和包被抗原(CPLX-COOH-OVA),并用紫外光谱法进行鉴定。用免疫抗原免疫BALB/c小鼠,制备环丙沙星衍生物多克隆抗体。通过ELISA方阵滴定法,确定包被抗原的最佳包被浓度和抗体最佳稀释度,建立了CPLX-COOH间接竞争ELISA检测方法,其半抑制浓度IC50为228.56 ng/mL,最低检出限(LOD)为25.527 ng/mL,该抗体具有广谱特异性,可与多种氟喹诺酮类药物发生交叉反应,可进行氟喹诺酮类药物残留的多元检测。
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