抗人肺腺癌单克隆抗体LC-1 IgM片段的分离、鉴定和初步应用

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将抗人肺癌单抗LC-1经0.25.0.5、1、2、4mmol/L不同浓度的二硫苏糖醇(DTT),在37℃作用15~120分钟,得出最佳条件是将纯化LC-1IgM与1mmol/LDTT溶液混匀,37℃保温60分钟,LC-1IgM降解为不同片段,经SephadexG150柱获得纯化的片段,该片段分子量经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酸胺凝胶电泳鉴定为118000,用ELISA法检测具有免疫活性,用 ̄(99m)Tc标记后注入带瘤裸鼠体内,能浓集于肿瘤病灶,显示该片段具有与人肺腺癌抗原特异结合的能力,有临床定位诊断的潜力. Anti-human lung cancer monoclonal antibody LC-1 by 0.25.0.5,1,2,4 mmol / L different concentrations of dithiothreitol (DTT), at 37 ℃ for 15 to 120 minutes, the best The condition is that the purified LC-1IgM is mixed with 1mmol / LDTT solution, incubated at 37 ° C for 60 minutes, the LC-1IgM is degraded into different fragments, and the purified fragment is obtained on a Sephadex G150 column. The molecular weight of the fragment is determined by sodium dodecyl sulfate-polyacrylic acid The results of enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) showed that it was immunoprecipitated by ELISA and labeled with ~ (99m) Tc before it was injected into the tumor-bearing nude mice and could accumulate in the tumor lesion, indicating that the fragment has specific binding to human lung adenocarcinoma antigen The ability to diagnose the clinical potential.
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