【摘 要】
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目的探讨维生素D受体（VDR）在糖尿病肾病（DKD）足细胞中的表达水平及在足细胞损伤及蛋白尿缓解中的作用。方法（1）本研究纳入了65例诊断患有2型糖尿病（伴或不伴蛋白尿）的患者，并纳入了25例年龄和性别相匹配的健康体检者为对照组。根据白蛋白/肌酐（ACR）的尿排泄比例对2型糖尿病患者进行分组，分别为无蛋白尿（ACR<30 mg/g，n=24）、微量白蛋白尿（ACR 30~300 mg/g，n=18
【机 构】
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郑州大学第一附属医院肾脏内科 郑州大学肾脏病研究所，郑州 450052,郑州大学第一附属医院肾脏内科 郑州大学肾脏病研究所，郑州 450052,郑州大学第一附属医院肾脏内科 郑州大学肾脏病研究所，郑州
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目的探讨维生素D受体（VDR）在糖尿病肾病（DKD）足细胞中的表达水平及在足细胞损伤及蛋白尿缓解中的作用。
方法（1）本研究纳入了65例诊断患有2型糖尿病（伴或不伴蛋白尿）的患者，并纳入了25例年龄和性别相匹配的健康体检者为对照组。根据白蛋白/肌酐（ACR）的尿排泄比例对2型糖尿病患者进行分组，分别为无蛋白尿（ACR<30 mg/g，n=24）、微量白蛋白尿（ACR 30~300 mg/g，n=18）和临床蛋白尿（ACR>300 mg/g，n=23）。另选择25例经肾活检确诊的DKD患者作为DKD组。正常肾脏组织标本均取自泌尿外科同一时期肾脏肿瘤切除患者10例。将各组检测指标进行对比，同时采用实时定量PCR、ELISA法和免疫组化法检测VDR在各组患者的血液、尿液样本和肾脏组织中的表达情况，以及使用Pearson相关分析分析VDR与尿蛋白的相关性。（2）在2型糖尿病肾病小鼠模型中对上述结果进行验证，将遗传背景均为C57BLKs/J的雄性db/db小鼠及同窝出生的db/m小鼠，随机分为正常对照组（A组）、DKD对照组（B组）、DKD二甲基亚砜处理组（C组）、DKD帕立骨化醇（VDR激动剂）处理组（D组），C、D组连续腹腔注射处理8周，对照组不做任何处理。小鼠10周龄时开始连续干预8周，在小鼠22周龄（开始干预后12周）检测各组小鼠体重、血、尿生化指标对比；Western印迹法检测β-catenin、VDR的变化；免疫荧光观察足细胞标志蛋白podocin及足细胞损伤蛋白α-SMA的表达变化。
结果（1）与正常健康对照组相比，无蛋白尿组、微量白蛋白尿组和临床蛋白尿组的糖尿病患者血浆中VDR的mRNA和蛋白水平均较低（均P<0.05）；与无蛋白尿组的糖尿病患者相比，微量白蛋白尿组和临床蛋白尿组的糖尿病患者血浆中VDR的mRNA和蛋白水平均较低（均P<0.05）。（2）与正常健康对照组相比，无蛋白尿糖尿病组和DKD组患者血浆中VDR的mRNA和蛋白水平均较低（均P<0.05）；与无蛋白尿糖尿病组患者相比，DKD组患者血浆中VDR的mRNA和蛋白水平亦较低（均P<0.05）。（3）免疫组化结果显示，DKD组肾组织中VDR的表达明显少于正常对照组。（4）DKD患者血浆中VDR mRNA相对水平与ACR呈负相关（r=-0.342，P<0.05）。（5）各组尿液上清液中VDR的水平与血浆中的水平呈相反趋势。（6）Western印迹结果显示，B组、C组肾小球足细胞β-catenin蛋白表达高于D组（均P<0.05），VDR蛋白的表达低于D组（均P<0.05）；免疫荧光结果显示，B组、C组肾小球足细胞podocin的表达低于D组（均P<0.05），α-SMA的表达高于D组（均P<0.05）。
结论VDR高表达缓解DKD足细胞损伤及蛋白尿。
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