【摘 要】
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目的构建小鼠MPI基因的基因打靶载体转染ES细胞,构建用于同源重组筛选的对照载体.方法根据计算机分析小鼠MPI基因的基因组序列,构建用于同源重组载体的长臂和短臂并且转染小
【机 构】
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中国科学技术大学生命科学学院,合肥,230027中国科学院上海生物工程研究中心,上海生命科学研究院;
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目的构建小鼠MPI基因的基因打靶载体转染ES细胞,构建用于同源重组筛选的对照载体.方法根据计算机分析小鼠MPI基因的基因组序列,构建用于同源重组载体的长臂和短臂并且转染小鼠ES细胞,经抗性筛选后得到阳性克隆,抽提基因组DNA后用PCR的方法进行重组子的初步筛选.结果成功构建了MPI基因的基因打靶载体并且摸索了用PCR的方法进行重组细胞初步筛选的方法.结论这个载体的构建为MPI基因功能的研究打下了基础,同时用PCR方法进行初步筛选大大减少了Southern杂交的工作量;利用实验小鼠来研究印迹基因是非常有效的方法,它不仅能了解印迹基因在小鼠生长发育过程中的功能,而且进而有助于研究人的相应印迹区.
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