【摘 要】
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为探讨miR-486-3p对乳腺癌细胞MCF-7凋亡的调控作用,采用qRT-PCR法和Western blot法测定24例乳腺癌组织和癌旁正常组织miR-486-3p和凋亡相关蛋白的表达水平;采用qRT-PCR法测定乳腺癌细胞MCF-7、HBL101和正常乳腺细胞MCF 10A中miR-486-3p的表达水平.将MCF-7、HBL101和MCF10A细胞分为正常对照组、模拟物对照组、miR-486-3p模拟物组、抑制物对照组和miR-486-3p抑制物组,各组细胞转染后进行培养,采用CCK-8法测定各组细
【机 构】
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重庆市中医院,乳腺甲状腺科,重庆400021
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为探讨miR-486-3p对乳腺癌细胞MCF-7凋亡的调控作用,采用qRT-PCR法和Western blot法测定24例乳腺癌组织和癌旁正常组织miR-486-3p和凋亡相关蛋白的表达水平;采用qRT-PCR法测定乳腺癌细胞MCF-7、HBL101和正常乳腺细胞MCF 10A中miR-486-3p的表达水平.将MCF-7、HBL101和MCF10A细胞分为正常对照组、模拟物对照组、miR-486-3p模拟物组、抑制物对照组和miR-486-3p抑制物组,各组细胞转染后进行培养,采用CCK-8法测定各组细胞增殖情况,采用细胞划痕法测定MCF-7和MCF10A细胞的迁移情况,采用Transwell法和流式细胞术测定各组细胞侵袭和凋亡情况,采用qRT-PCR和Western blot法测定凋亡相关蛋白mRNA和蛋白的表达水平.该研究得出乳腺癌组织中miR-486-3p表达水平较癌旁正常组织显著降低(P＜0.05),乳腺癌组织中Bcl-2蛋白表达水平较癌旁正常组织显著增加(P＜0.05),而Bax和Caspase-3蛋白表达水平较癌旁正常组织显著降低(P＜0.05).乳腺癌细胞MCF-7和HBL101中miR-486-3p表达水平较正常乳腺细胞MCF 10A显著降低(P＜0.05),其中以乳腺癌细胞MCF-7中miR-486-3p表达水平最低.miR-486-3p模拟物组乳腺癌细胞MCF-7和HBL101中miR-486-3p的表达水平较模拟物对照组显著升高(P＜0.05),miR-486-3p抑制物组miR-486-3p的表达水平较抑制物对照组显著降低(P＜0.05).miR-486-3p模拟剂组乳腺癌MCF-7和HBL101细胞在24 h、48 h和72 h时的吸光度值较模拟物对照组显著降低(P＜0.05),而miR-486-3p抑制物组在24 h、48 h和72 h时吸光度值较抑制物对照组显著升高(P＜0.05).miR-486-3p模拟剂组乳腺癌MCF-7细胞划痕宽度显著宽于模拟物对照组(P＜0.05),而miR-486-3p抑制物组乳腺癌MCF-7细胞划痕宽度显著窄于抑制物对照组(P＜0.05).miR-486-3p模拟剂组乳腺癌MCF-7细胞穿膜细胞数量较模拟剂对照组显著降低(P＜0.05),而miR-486-3p抑制物组穿膜细胞数量较抑制物对照组显著升高(P＜0.05).miR-486-3p模拟剂组乳腺癌MCF-7细胞凋亡数量较模拟物对照组显著升高(P＜0.05),而miR-486-3p抑制物组细胞凋亡数量较抑制物对照组显著降低(P＜0.05).miR-486-3p模拟剂组乳腺癌MCF-7细胞中Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平较模拟物对照组显著降低(P＜0.05),Bax和Caspase-3表达水平显著升高(P＜0.05),miR-486-3p抑制物组Bcl-2表达水平较抑制物对照组显著升高(P＜0.05),Bax和Caspase-3表达水平显著降低(P＜0.05).总之,miR-486-3p是乳腺癌的抑癌基因,可能通过调节凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Caspase-3 mRNA及蛋白的表达,而对乳腺癌细胞的凋亡起促进作用.
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