【摘 要】
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目的:前期研究表明,人TF基因第15号外显子处P589S变异与有氧耐力相关联.在此基础上,分析该位点变异对TF蛋白质C2结构域的影响,以探讨其影响有氧耐力的机制.方法:应用生物信息
【机 构】
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兰州城市学院,甘肃兰州,730070;西北民族大学,甘肃兰州,730030;北京体育大学,北京,100084
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目的:前期研究表明,人TF基因第15号外显子处P589S变异与有氧耐力相关联.在此基础上,分析该位点变异对TF蛋白质C2结构域的影响,以探讨其影响有氧耐力的机制.方法:应用生物信息学方法,以TF蛋白C2结构域序列为基础,用DNAStarProtean软件提供的模块,预测P589S突变对其C2结构域的二级结构、蛋白骨架区的柔韧性、表面可能性、抗原系数以及亲水性指数的影响.应用分子生物学方法,人工合成含有P589(Tr(P))和S589(TF(S))的C2结构域序列,构建原核表达重组质粒,在E coli.中分别进行表达,圆二色谱检测并比较不同表达蛋白二级结构的差异.结果:软件预测结果显示,当第589氨基酸由P突变为S时,C2结构域中氨基酸的二级结构发生了改变,在突变位点附近,氨基酸的表面可能性及亲水性均下降,而抗原系数则呈现出先升高后下降的现象.蛋白骨架区的柔韧性没有发生变化.圆二色谱检测结果显示,两种蛋白CD谱的负峰最低峰都出现在约205nm处,但TF(P)的峰度要低于TF(S).计算结果表明,TF(P)蛋白的α螺旋比例较TF(S)蛋白高,其他结构比例相差不大.结论:转铁蛋白P589S多态位点突变后,蛋白质C2结构域的二级结构和蛋白表面性质发生了改变,这种变化将导致基因的相关功能改变,并成为影响有氧耐力的因素之一.
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