【摘 要】
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以促性腺激素释放激素(LHRH)的高效类似物(D-Lys6)LHRH作为示踪物.在垂体膜制剂和胶原酶及胰酶分散的体外培养的垂体细胞水平上,研究了绍鸭垂体LHRH受体的结合特性.106个垂体
【机 构】
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浙江农业大学动物科学学院核农学研究所,浙江,杭州,310029;
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以促性腺激素释放激素(LHRH)的高效类似物(D-Lys6)LHRH作为示踪物.在垂体膜制剂和胶原酶及胰酶分散的体外培养的垂体细胞水平上,研究了绍鸭垂体LHRH受体的结合特性.106个垂体细胞与125I-(D-Lys6)LHRH在4℃孵育90min能获得较高的结合率,经24h孵育后结合率显著下降.125I-(D-Lys6)LHRH与垂体膜制剂的结合率随膜制剂的浓度增加而增加,在每管相当于1～2个垂体浓度范围内呈正相关.特异性结合随125I-(D-Lys6)LHRH量的增加而增加,实验结果经Scatchard分析揭示出特异性结合与结合和游离125I-(D-Lys6)LHRH之比呈线性关系,预示绍鸭垂体对(D-Lys6)LHRH存在同一类高亲和力的结合位点.垂体膜制剂和垂体整体细胞的平衡解离常数(Kd)分别为0.34nM和0.43nM,两个Kd值相近且垂体整体细胞显示出较大的最大结合容量(Bmax),这说明本研究的酶法消化分散垂体细胞对其LHRH受体的损伤较小.(D-Lys6)LHRH(10-11～10-6M)能取代示踪物的特异性结合.本研究结果验证了绍鸭垂体LHRH受体的存在并提供了其基本结合特性.
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