柑桔黄龙病病原DNA片段的克隆及序列分析

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本研究利用聚合酶链式反应技术 (PCR) ,合成了中国柑桔黄龙病病原的一段 DNA片段。将此片段插入到 p UC18的 Eco RI位点 ,并转化进大肠杆菌 (Escherichia coli)的 DH5α菌株中。通过 PCR鉴定 ,限制性内切酶 (Eco RI)酶切分析及核苷酸序列分析 ,均表明克隆成功。序列分析结果显示 ,克隆片段与已知相应序列间同源性达 98.6 %。该研究为制备柑桔黄龙病病原 DNA分子探针奠定了基础。 In this study, a DNA fragment of the pathogen of Chinese citrus Huanglongbing was synthesized by polymerase chain reaction (PCR). This fragment was inserted into the Eco RI site of pUC18 and transformed into DH5α strain of Escherichia coli. Identification by PCR, restriction enzyme EcoRI digestion analysis and nucleotide sequence analysis showed that the cloning was successful. Sequence analysis showed that the homology between the cloned fragment and the known sequence was 98.6%. This study laid the foundation for the preparation of DNA molecular probe of citrus Huanglongbing pathogen.
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