【摘 要】
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目的 观察体外诱导骨髓间充质干细胞(BMSC)能否向肝样细胞分化,探讨经脾移植BMSC治疗终末期肝病的可行性.方法 SD大鼠全骨髓贴壁法培养、分离、扩增间充质干细胞,肝细胞生长
【基金项目】
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上海市卫生局资助项目;上海市科委重点基金
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目的 观察体外诱导骨髓间充质干细胞(BMSC)能否向肝样细胞分化,探讨经脾移植BMSC治疗终末期肝病的可行性.方法 SD大鼠全骨髓贴壁法培养、分离、扩增间充质干细胞,肝细胞生长因子(HGF)和成纤维细胞生长因子-4(FGF-4)联合诱导第五代细胞.免疫荧光法检测第五代BMSC甲胎蛋白(AFP)和细胞角蛋白18(CK-18)表达.受体大鼠随机分为实验组(结扎并横断胆总管)和对照组.经脾注射CM-Dil荧光标记的第五代细胞悬液,荧光显微镜观察肝组织内细胞分布,图像分析软件计算各视野累积光密度(IOD),并分析其与门静脉压力关系.结果 经过HGF、FGF-4诱导的骨髓第五代间充质细胞在电镜下可见其高尔基体、内质网、核糖体、线粒体等细胞器明显增多.免疫荧光显示诱导后细胞AFP、CK-18表达均为阳性.CM-Dil对BMSC的标记率可达99.5％.细胞移植后,实验组肝脏内移植细胞累积光密度值明显高于对照组(1 130067±209464比293 505±88 383,P＜0.01).细胞分布评分结果显示实验组低于对照组(1.99±0.36比2.36±0.27,P＜0.05).结论 HGF和FGF-4可联合诱导BMSC分化为AFP和CK-18表达阳性的肝样细胞.胆道梗阻致门静脉压力增高时,经脾种植BMSC后肝内移植细胞迁移增多,提示经脾移植BMSC有治疗终末期肝病的可能.
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