【摘 要】
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目的:探讨在肝细胞肝癌Huh-7细胞中前列腺素E2EP3各受体亚型对肿瘤细胞生长与侵袭的作用.方法:对常规培养的人肝细胞肝癌Huh-7细胞,瞬时转染EP3受体的4个亚型EP3-4R、EP3-5R
【机 构】
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南京医科大学肿瘤中心,病理学系,江苏南京210029
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目的:探讨在肝细胞肝癌Huh-7细胞中前列腺素E2EP3各受体亚型对肿瘤细胞生长与侵袭的作用.方法:对常规培养的人肝细胞肝癌Huh-7细胞,瞬时转染EP3受体的4个亚型EP3-4R、EP3-5R、EP3-6R、EP3-7R,应用RT-PCR实验检测转染细胞EP3受体各亚型的mRNA表达水平;应用Western blot实验检测相关蛋白水平.对转染后的Huh-7细胞,分别给予不同浓度的EP3受体激动剂sulprostone作用24 h,用WST-8细胞增殖测定试剂检测细胞的增殖情况;应用划痕实验检测细胞的侵袭性;应用Western blot实验检测细胞内ERK蛋白磷酸化水平的变化.结果:RT-PCR及Western blot实验结果显示Huh-7细胞EP3受体表达水平明显增高.WST-8实验显示,经10 μmol/L sulprostone处理24 h后,过表达EP3-4R、EP3-5R和EP3-7R亚型的细胞增殖率分别达到126.7％、124.0％、123.8％.划痕实验结果显示,过表达细胞的侵袭性分别增加到135.8％、123.5％、128.7％.Westem blot显示,EP3-4R、EP3-5R和EP3-7R转染细胞内ERK磷酸化水平分别上调了54.8％、33.4％、44.3％.而过表达EP3-6受体亚型细胞的增殖率、侵袭率和胞内ERK磷酸化水平改变不明显.结论:Huh-7肝癌细胞中,EP3-4R、EP3-5R及EP3-7R这3种受体亚型对细胞的生长及侵袭有显著促进作用,而EP3-6R亚型则无明显的促进作用.EP3受体促进肝癌细胞生长和侵袭的作用与ERK激活的现象一致.
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