牛呼吸道病毒多重PCR检测方法的建立及应用

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为建立同时检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)、牛冠状病毒(BCoV)、牛副流感病毒3型(BPIV-3)这5种牛呼吸道病毒的方法,根据BVDV的5\'UTR、IBRV的gB基因、BRSV的N基因、BCoV的N基因、BPIV3的HN基因序列设计特异性引物,建立了一种多重PCR检测方法.结果 显示,该方法对其他牛源病毒及细菌无特异性扩增,对BVDV、IBRV、BRSV、BCoV、BPIV3的最低检测限分别为103,103,104,103,104拷贝/μL.对采集自宁夏地区186份鼻拭子样本的检测结果显示,BVDV、IBRV、BRSV、BCoV、BPIV3阳性检出率分别为8.06% (15/186),10.75%(20/186),15.05%(28/186),16.67% (31/186),7.53% (14/186),与单重PCR检测结果一致.结果 表明,本试验建立的多重PCR检测方法可用于牛呼吸道病毒的检测及流行病学调查.
其他文献
多年来,为追求高产化肥投入过量,畜禽养殖废弃物和农作物秸秆等有机肥资源利用率不高,在增加农业生产成本的同时,农产品的品质和生产效益不高,也给环境造成不利影响[1].化肥减量有机替代模式与单施化肥相比,使土壤养分平稳释放,在提高作物产量同时,又能提高作物品质,还可以减少农田面源污染,使生态环境得到切实保护[2-3].现有研究显示有机肥的施用土壤肥力得到很好改善4-5],在多种作物上表现了良好的效果[6-10].因此,推进有机肥替代化肥,是改善农业环境的迫切需要,是生产绿色优质农产品的迫切需要,是促进农业节本
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福建省顺昌县是国家级商品粮基地县之一,水稻是该县的主要粮食作物.近年来,随着酸雨沉降不断增加,化肥大量施用等因素的影响,土壤酸化已成为制约我国农业可持续发展的主要障碍之一[1].pH是土壤肥力的重要指标,土壤中有机质的合成与分解、氮磷等营养元素的转化与释放等均与土壤pH有关[2-3].但是水稻作物总体经济效益低,因此水稻土壤酸化问题长期未受到关注[4].施用土壤改良剂是改良酸化土壤的主要方法[5].土壤改良剂能有效地改善土壤理化性状和土壤养分状况,促进植物对水分与养分的吸收,从而提高退化土壤的生产能力[6
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为检验不同药械对草害的防效,同时确定杂草防治药械使玉米高产高效的理论依据,做好今后的统防统治技术储备,2020年进行不同药械对玉米田杂草防除效果试验示范.示范结果表明,无人机喷施除草剂对杂草株防效在70%左右,鲜重防效达95%以上.与对照区相比,除草剂施药区增产37.9%,投入收益比达1∶22.12,增产效果显著.无人机喷施除草剂作业效率高,节水节药,用工少,简便易行,值得大面积推广应用.
以棉隆作为防治设施内种植青椒、番茄、黄瓜、茄子的土壤消毒剂,进行了多年防治试验,试验结果表明:对4种蔬菜根结线虫的防治效果分别为90.4%、97.1%、93.9%、94.7%;对枯萎病的防治效果分别为91.2%、93.2%、93.9%、96.3%;对黄萎病防治效果分别为90.7%、82.7%、89.1%、90.6%;对根腐病的防治效果分别为93.2%、94.5%、90.6%、94.1%.棉隆不但对促进作物长势、增产、防治杂草生长均有显著作用,同时棉隆还是高效、低毒、无残留的环保型广谱性综合土壤熏蒸消毒剂.
近年来,随着小米市场需求量的增大和谷子免(少)间苗技术在晋城市的推广应用,谷子种植面积稳定在15万亩左右,但在种植过程中,谷农未能足够重视对粟叶甲的防治,导致该虫危害呈逐年加重的趋势,给谷农造成了一定的损失.通过对粟叶甲的发生进行认真的调查和分析,提出了针对性的防治意见,并取得了良好的效果.
为探讨药肥混喷对防治稻纵卷叶螟效果的影响,2020年用20%氯虫苯甲酰胺悬浮剂与不同类型的叶面肥、离子硅、磷酸二氢钾、融多乐和海藻多维素进行了混喷防治稻纵卷叶螟的田间试验.结果表明:在相同用药量的情况下,药肥混喷后的保叶和杀虫效果均表现有不同程度的下降趋势.因此,在采取药肥混喷时,为确保预期的防治效果,建议应适当增加单位面积的用药剂量.
用纯化的塞尼卡病毒(Seneca Valley yirus,SVV) VP1蛋白,辅以不同佐剂免疫小鼠,分别从体液免疫及细胞免疫对小鼠的免疫效果进行评估.结果 表明,VP1-AL组与VP1-FCA组的特异性抗体一免后7d均呈显著上升趋势,PBS组变化不明显.二免后14 d,VP1-FCA组特异性抗体效价达到最高值(1∶163840),PBS组抗体效价是1∶16(P<0.01);VP1-AL组特异性抗体效价达到最高值(1∶5120),PBS组抗体效价是1∶16(P<0.01).中和抗体效价,二免后7 d V
近年来,我国政府高度重视“三农”工作,在确保粮食安全和主要农产品供给的基础上,大力实施化肥减量增效行动,在此背景下,功能肥料作为传统化肥升级替代产品备受市场青睐.rn功能肥内卷时代,产品力才是最稳定的“根据地”rn沃稞生物科技(大连)有限公司(以下简称沃稞)总经理戴子叁表示,肥料功能化是当前肥料发展方向,“节水、节肥、省工、提升作物产量、解决作物生长中的问题”等成为功能性肥料的强有力抓手,促进农产品提质增效,沃稞主打品牌肥料——“劲驼”系列功能肥就是基于节肥减排和高产提质增效两方面的需求而开发的.
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猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)是严重危害世界养猪业的重要病原.PRRSV对原代猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophage,PAM)和传代猪肺泡巨噬细胞系(im-mortalized porcine alveolar macrophage,IPAM)均易感,但在感染早期,PRRSV在IPAM中的感染率显著高于PAM.为了揭示这2种细胞在PRRSV感染后的应答差异,本研究运
非洲猪瘟病毒(ASFV)、经典猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是目前影响猪群和我国养殖业的重要的3种病原,且3种疾病临床表现相似,因此,建立一种可以快速检测、区分3种病原的方法十分必要.本研究依据ASFV、CSFV、PRRSV的基因保守片段设计特异性引物和探针,建立了多重荧光PCR检测方法.结果 显示,所建立的多重荧光PCR可同时检测ASFV、CSFV、PRRSV 3种病原,特异性好、灵敏度高,对3种病原的检测下限分别达到13,16,26个拷贝;重复性良好,组内及组间重复试验的变