【摘 要】
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目的 探讨绞股蓝皂苷(XLIX)调节可溶性T细胞免疫球蛋白和粘蛋白域3(sTim-3)和Tim-3比率在非小细胞肺癌(NSCLC)细胞免疫逃逸中的作用机制.方法 收集临床NSCLC组织,培养A549 NSCLC细胞.使用Tim-3的小干扰RNA重组质粒(siTim-3)和阴性对照(siNC)转染A549细胞;使用5、20、80 μg/ml的XLIX处理A549细胞48 h,A549分别对应的组别为对照组、XLIX-5 μg、XLIX-20 μg、XLIX-80 μg组;MTT法检测细胞增殖活性;Trans
【机 构】
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250031济南,山东省立第三医院肿瘤血液科;250031济南,山东省立第三医院肿瘤科
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目的 探讨绞股蓝皂苷(XLIX)调节可溶性T细胞免疫球蛋白和粘蛋白域3(sTim-3)和Tim-3比率在非小细胞肺癌(NSCLC)细胞免疫逃逸中的作用机制.方法 收集临床NSCLC组织,培养A549 NSCLC细胞.使用Tim-3的小干扰RNA重组质粒(siTim-3)和阴性对照(siNC)转染A549细胞;使用5、20、80 μg/ml的XLIX处理A549细胞48 h,A549分别对应的组别为对照组、XLIX-5 μg、XLIX-20 μg、XLIX-80 μg组;MTT法检测细胞增殖活性;Transwell侵袭实验检测细胞侵袭率变化.另外,加入XLIX-80 μg或给予XLIX-80 μg+Tim-3抗体(anti-Tim-3)或XLIX-80 μg+金属蛋白酶(ADAM) 10,Western blot检测Tim-3、sTim-3、金属蛋白酶ADAM-10/-17、Tim-3配体Galeetin-9、干扰素γ(INF-γ)、肿瘤坏死因子(TNF)-α的蛋白表达,ELISA法检测组织中sTim-3的表达水平.结果 与癌旁组比,NSCLC组织中Tim-3水平升高,而sTim-3、ADAM-10及ADAM-17表达降低(均P<0.05).A549细胞中,与siNC比,siTim-3的INF-γ、TNF-α的表达、细胞活性及侵袭率均下调(均P<0.05).与对照组相比,XLIX-20 μg和XLIX-80 μg组抑制A549细胞增殖活性和侵袭率,上调A549细胞sTim-3/Tim-3的比率,但下调Galectin-9表达,差异均有统计学意义(均P<0.05).另外,XLIX-80μg处理A549后,在此基础上使用anti-Tim-3处理,可以明显上调TNF-αr和INF-γ表达,但是下调sTim-3Tim-3的比率(均P<0.05).而在XLIX-80 μg处理基础上使用ADAM10处理,sTim-3上调,并抑制TNF-α和INF-γ表达(均P<0.05).结论 XHX可减少NSCLC细胞的免疫逃逸,XLIX促进sTim-3/Tim-3比率升高可能是其对NSCLC免疫逃逸抑制作用关键机制之一.
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