探讨黏着斑蛋白Kindlin－2对胆囊癌细胞生物学行为的影响及相关分子机制。
方法收集2012年9月至2013年5月在郑州大学第一附属医院肝胆胰外科接受手术切除的30例胆囊癌组织和癌旁组织标本。使用real－time PCR和免疫组化方法检测胆囊癌组织和癌旁组织标本中Kindlin－2表达水平；通过构建质粒和转染使胆囊癌细胞株GBC－SD、SGC－996过表达Kindlin－2，应用细胞黏附实验观察胆囊癌细胞与胞外基质的黏附能力，通过Transwell侵袭实验及细胞划痕实验观察胆囊癌细胞的侵袭迁移能力改变；采用免疫印迹法检测过表达Kindlin－2后胆囊癌细胞上皮间质转化相关标记蛋白的变化。分别使用t检验和χ2检验对计量资料和计数资料进行统计学分析。
结果real－time PCR和免疫组化检测结果显示，Kindlin－2在人胆囊癌组织中表达水平高于癌旁组织(t＝4.372，P＝0.001；t＝7.477，P＝0.000)，肿瘤组织Kindlin－2表达水平与Nevin分期密切相关(χ2＝5.932，P＝0.035)；细胞黏附实验结果显示，过表达Kindlin－2后胆囊癌细胞株GBC－SD、SGC－996与细胞外基质分子纤连蛋白Fibronectin的黏附能力较对照组增强(1.66±0.03比1.07±0.22，t＝2.710，P＝0.041；2.66±0.24比1.03±0.02，t＝6.610，P＝0.020)；Transwell侵袭实验结果显示，过表达Kindlin－2后胆囊癌细胞株GBC－SD、SGC－996穿过Transwell小室基质的细胞数较对照组明显增多(116.1±13.9比54.7±8.4，t＝3.781，P＝0.0194；136.3±7.5比64.3±6.4，t＝7.302，P＝0.002)；细胞划痕实验结果显示，过表达Kindlin－2后胆囊癌细胞株GBC－SD 12 h和24 h划痕修复率高于对照组[(42.9±2.2)%比(29.7±1.7)%，t＝4.690，P＝0.009；(65.0±2.4)%比(40.4±2.0)%，t＝7.945，P＝0.001]，过表达Kindlin－2后胆囊癌细胞株SGC－996 12 h和24 h划痕修复率高于对照组[(32.9±1.3)%比(24.1±1.5)%，t＝4.518，P＝0.011；(51.3±1.1)%比(39.2±1.1)%，t＝8.001，P＝0.001]；免疫印迹法检测结果显示，过表达Kindlin－2后胆囊癌细胞间质化表型神经钙黏素、波形蛋白表达上调而上皮化表型上皮钙黏素表达降低。
结论Kindlin－2在胆囊癌组织中表达水平升高，且可通过诱导上皮细胞间质转化促进胆囊癌细胞与胞外基质黏附、侵袭迁移等恶性行为。