【摘 要】
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[目的]研究中介体亚基Med15B (ORF CAGL0H06215g)介导的脂肪酸代谢影响光滑球拟酵母(Candida glabrata)耐受低pH胁迫的生理机制.[方法]在菌株△med15B中过量表达脂肪酸延伸酶
【机 构】
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江南大学食品科学与技术国家重点实验室,江苏无锡214122;江南大学教育部工业生物技术重点实验室,江苏无锡214122;江南大学食品微生物制造工程研究室,江苏无锡214122
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[目的]研究中介体亚基Med15B (ORF CAGL0H06215g)介导的脂肪酸代谢影响光滑球拟酵母(Candida glabrata)耐受低pH胁迫的生理机制.[方法]在菌株△med15B中过量表达脂肪酸延伸酶基因elo1 (ORF CAGL0L08184g)和△9去饱和酶基因ole1 (ORF CAGL0I00418g),构建过表达菌株△med15B/elo1-ole1,然后与菌株△med15和亲本菌株ATCC55对比分析基因elo1和ole1的表达水平、脂肪酸组分比例、细胞膜完整性和耐受能力在pH 2.0和pH 6.0条件下的差异.[结果]发现,在pH 2.0条件下过表达菌株△med15B/elo1-ole1:(1)基因elo1和ole1表达水平比菌株△med15B分别上调了4.1倍和3.3倍,与亲本菌株ATCC55相比分别上调了2.5倍和2.2倍;(2)脂肪酸平均链长延长至17.4,高于菌株△med15B的16.8和亲本菌株ATCC55的17.1;不饱和脂肪酸与饱和脂肪酸的比值比菌株△med15B和亲本菌株ATCC55分别提高了53.1％和41.5％;(3)碘化丙啶(PI)染色细胞数占总检测细胞数的比例,与菌株△med15B和亲本菌株ATCC55比较分别下降了60.8％和37.7％;(4)细胞半抑制pH(胁迫)(IC50)值达到pH 2.3,比菌株△med15B的pH3.7和亲本菌株ATCC55的pH 3.1具有更强的耐受能力.[结论]在菌株△med15B中过表达基因elo1和ole1能通过提高长链脂肪酸和不饱和脂肪酸含量,增强细胞对低pH胁迫的耐受能力.
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