探讨Klotho蛋白（一种单向跨膜蛋白）对脓毒症急性肾损伤（AKI）小鼠的保护作用及其作用机制。
方法选取6～8周龄、SPF级健康雄性C57BL/6小鼠60只，按随机数字表法分为假手术组（Sham组）、脓毒症模型组（CLP组）和Klotho蛋白干预组（CLP+KL组），每组20只。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）制备脓毒症AKI小鼠模型；Sham组除不结扎、穿刺盲肠外，其余手术步骤相同。CLP+KL组术后连续4 d腹腔注射Klotho蛋白0.02 mg/kg；Sham组和CLP组注射等量生理盐水。术后24 h取各组小鼠眼眶血，采用肌氨酸氧化酶法和脲酶法分别检测血肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）水平。术后5 d于麻醉后取小鼠肾组织，采用苏木素-伊红（HE）染色评估肾脏病理损伤；透射电镜下观察肾小管上皮细胞线粒体超微结构；用微量酶标法测定线粒体中还原型谷胱甘肽（GSH）水平，用硫代巴比妥酸法测定线粒体中丙二醛（MDA）含量，用比色法测定线粒体中一氧化氮合酶（NOS）活性；用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测肾组织Klotho、Bcl-2和细胞色素C（Cyt C）蛋白表达。
结果Sham组肾组织结构清晰、完整。与Sham组相比，CLP组肾小球和肾小管上皮细胞明显水肿，小管腔内可见透明管型，间质有大量炎性细胞浸润；血清SCr和BUN水平均显著高于Sham组〔SCr（μmol/L）：182.60±6.97比47.20±5.37，BUN（mmol/L）：53.70±5.12比18.70±2.62，均P<0.01〕；透射电镜下可见线粒体嵴肿胀、变形，嵴结构破坏，基质密度降低，外膜丧失；线粒体氧化应激因子水平显著升高〔MDA（μmol/g）：1.172±0.046比0.746±0.094，GSH（μmol/g）：5.765±0.059比4.223±0.072，NOS（kU/g）：0.91±0.05比0.68±0.03，均P<0.01〕；肾组织Klotho蛋白、Bcl-2蛋白表达水平明显下降，Cyt C蛋白表达水平显著增加（Klotho/- actin：0.188±0.020比0.538±0.024，Bcl-2/- actin：0.311±0.010比0.391±0.015，Cyt C/- actin：0.226±0.010比0.135±0.006，均P<0.01）。与CLP组比较，CLP+KL组肾小球和小管上皮细胞水肿减轻，小管腔内透明管型有所减少；血清SCr和BUN水平显著下降〔SCr（μmol/L）：85.70±7.23比182.60±6.97，BUN（mmol/L）：35.30±3.50比53.70±5.12，均P<0.01〕；线粒体结构相对完整；线粒体氧化应激因子水平显著下降〔MDA（μmol/g）：0.958±0.072比1.172±0.046，GSH（μmol/g）：4.756±0.107比5.765±0.059，NOS（kU/g）：0.79±0.02比0.91±0.05，均P<0.01〕；肾组织Klotho蛋白、Bcl-2蛋白表达水平显著升高，而Cyt C蛋白表达水平显著下降（Klotho/- actin：0.336±0.011比0.188±0.020，Bcl-2/- actin：0.474±0.017比0.311±0.010，Cyt C/- actin：0.168±0.006比0.226±0.010，均P<0.01）。
结论Klotho蛋白通过维持线粒体结构完整和氧化应激反应对脓毒症AKI小鼠肾脏起到保护作用。