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采用Beagel犬血浆平衡透析法,高效液相色谱法测定丙泊酚微乳注射液与Beagel犬血浆蛋白结合率.色谱柱:Agilent C18柱(5μm,4.6 mm×150 mm)；流动相:0.01 mol/L乙酸铵(pH 7.0)∶乙腈=20∶ 80(V/V)；紫外检测波长:215 nm.丙泊酚在5～ 600 ng/mL范围内线性关系良好.丙泊酚微乳注射液在质量浓度为50、400、1000 ng/mL时与血浆蛋白结合率分别为(96.97±0.52)％、(97.73±0.76)％、(97.74±0.58)％.HPLC法能较好的应用于丙泊酚微乳注射液血浆蛋白结合率的测定,丙泊酚微乳注射液具有较高强度的血浆蛋白结合率.