【摘 要】
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[背景]前期工作中,从北大仓白酒大曲分离到一株真菌,经形态学和分子生物学方法,将其鉴定为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporim) M1,研究发现该菌能产中性蛋白酶.中性蛋白酶是应用
【机 构】
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齐齐哈尔大学生命科学与农林学院抗性基因工程与寒地生物多样性保护重点实验室 黑龙江齐齐哈尔 161005;东北农业大学生命科学学院 黑龙江哈尔滨 150030
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[背景]前期工作中,从北大仓白酒大曲分离到一株真菌,经形态学和分子生物学方法,将其鉴定为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporim) M1,研究发现该菌能产中性蛋白酶.中性蛋白酶是应用于工业化生产的重要酶制剂.由于其作用条件温和、催化速率较高,被广泛应用于食品、医药、皮革、饲料、化工和废弃物处理行业.[目的]为了使该菌蛋白酶应用于相关工业生产,需要对该蛋白酶进行纯化和酶学特性研究.[方法]采用硫酸铵分级分离、疏水和离子交换层析对该菌蛋白酶进行纯化,通过SDS-PAGE测定酶的纯度和分子量,并研究其热稳定性和酸碱适应性.[结果]经各步层析,蛋白酶纯化倍数达26.1,得率为7.9％;经测定纯酶的分子量为62 kD;该酶最适温度为40℃,最适pH为7.0,属于中性蛋白酶;该酶对酸较敏感,对碱有较强的耐受性;耐热性较强,但酶活性不受乙二胺四乙酸二钠盐抑制.[结论]由于该中性蛋白酶具有较好的耐热性,因此,可作为工业生产上潜在的生物催化剂.
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