研究红芪多糖(HPS)对高糖条件下人脐静脉内皮细胞(HUVEC)合成和释放一氧化氮(NO)和内皮素–1(ET–1)的影响及作用机制。
方法从新鲜脐带中分离HUVEC进行鉴定、培养，细胞分为正常对照组、高糖组(30 mmol/L葡萄糖)和HPS干预组。MTT比色法分析HPS对高糖诱导HUVEC增殖率的影响，流式细胞术Annexin–V/PI双染法检测细胞凋亡，硝酸盐还原酶法检测上清液中NO的水平，分光光度法检测细胞内一氧化氮合酶(NOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的浓度，酶联免疫吸附(ELISA)法检测上清液中ET–1的含量，实时荧光定量聚合酶链反应(RT–PCR)检测细胞内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、ET–1和c–Jun氨基末端激酶1(JNK1) mRNA的表达水平。组间差异显著性检验使用单因素方差分析，组间两两比较使用LSD法。
结果高糖组在6 h [(82.4±3.5)%]、24 h[(68.2±1.4)%]、48 h[(63.0±2.9)%]的细胞增殖率显著低于对照组(100%，P<0.05)；HPS干预组细胞增殖率随浓度变化呈现先上升后下降的趋势，其中50 mg/L [(85.3±4.6)%]、100 mg/L[(89.6±1.1)%]、200 mg/L [(88.8±3.6)%]HPS干预组较高糖组增加，差异具有统计学意义(均P<0.05)；高糖组NO[(24.84±1.34)μmol/L]、NOS[(0.54±0.06) U/ml]含量较正常对照组呈现下降的趋势，iNOS [(0.133±0.015) U/ml]和ET–1[(0.740±0.070) ng/ml]含量则在各时间点均高于对照组，HPS干预组升高不同时间点HUVEC内NO[(23.20±0.55)μmol/L]、NOS[(0.46±0.10) U/ml]、以及降低iNOS[(0.08±0.020) U/ml]和ET–1[(0.710±0.030) μg/L]的变化，P<0.05，使其趋向正常水平；HPS可提高高糖所致内皮细胞eNOS mRNA的水平[(0.33±0.02)比(0.23±0.04)]，降低ET–1 mRNA的水平(2.28±0.31比2.79±0.29)；高糖组细胞内JNK1 mRNA水平表达(2.95±0.05)较正常对照组(1.00±0.00)显著增加(P<0.05)，而HPS干预组(1.45±0.05)则较高糖组(2.95±0.05)明显减少(P<0.05)。
结论HPS对体外高糖诱导HUVEC损伤具有保护作用，这一作用可能与抑制JNK信号通路有关。