【摘 要】
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目的 构建人GATA1基因的真核表达载体,研究其对乳腺癌细胞生长的影响.方法 以人乳腺文库为模板,采用PCR技术扩增出GATA1编码序列,将其插入到pcDNA3.0-FLAG载体中;将重组质粒
【机 构】
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军事科学院军事医学研究院生物工程研究所,北京,100850
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目的 构建人GATA1基因的真核表达载体,研究其对乳腺癌细胞生长的影响.方法 以人乳腺文库为模板,采用PCR技术扩增出GATA1编码序列,将其插入到pcDNA3.0-FLAG载体中;将重组质粒与空载体分别转染293 T细胞,Western印迹检测GATA1表达情况,并通过生长曲线研究GATA1对乳腺癌细胞生长的影响,细胞划痕实验检测GATA1对细胞迁移的影响.结果 双酶切实验以及测序结果表明,pcDNA3.0-FLAG-GATA1的真核表达载体构建成功;Western印迹发现,GATA1在293T细胞中成功表达;生长曲线实验得出,GATA1可促进乳腺癌细胞的生长,细胞划痕实验表明GATA1促进细胞迁移.结论 成功构建了pcDNA3.0-FLAG-GATA1的真核表达载体,并发现GATA1可促进乳腺癌细胞的生长和迁移.
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