【摘 要】
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目的 研究胃癌细胞在表皮生长因子(EGF)刺激下表皮生长因子受体(EGFR)相互作用蛋白的时序性变化.方法 筛选高表达EGFR的胃癌细胞系;EGF刺激不同时间后,利用甲醛固定免疫沉淀
【机 构】
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军事科学院军事医学研究院生命组学研究所,国家蛋白质科学中心(北京),北京蛋白质组研究中心,蛋白质组学国家重点实验室,北京 102206
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目的 研究胃癌细胞在表皮生长因子(EGF)刺激下表皮生长因子受体(EGFR)相互作用蛋白的时序性变化.方法 筛选高表达EGFR的胃癌细胞系;EGF刺激不同时间后,利用甲醛固定免疫沉淀联合质谱(IP-XL/MS)技术对胃癌细胞中EGFR相互作用蛋白表达谱进行无标定量,捕获EGFR网络的动态变化.结果与结论 8种胃癌细胞系中,SGC7901细胞表达EGFR量最高. 4次生物学重复实验,共鉴定到3728个蛋白,625个EGFR相互作用蛋白,包括已知的相互作用蛋白( GRB2、CBL、SHC1 等) ,并发现59 个新蛋白( ANKFY、LGR4、SNX3、VPS26 A、ZFYVE20等). ANOVA检验分析得到406个响应EGF刺激的差异表达蛋白,根据动力学变化可分成5个簇,其具有不同的生物学功能,如蛋白转运、內吞、囊泡循环和蛋白酶体输运等,共同参与EGFR信号传递的动态调控,交叉调节多条信号通路.
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