【摘 要】
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采用异羟基洋地黄毒苷配基(Digoxigenin,(Dig)-11-dUTP),以随机引物法标记含有恶性疟原虫(P.f.)DNA的重组质粒片段(酶切克隆pPF14),制成pPF14-F-Dig探针。用此探针,以斑点杂
【机 构】
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南京医学院寄生虫学教研室,南京医学院寄生虫学教研室,南京医学院寄生虫学教研室,南京医学院寄生虫学教研室
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采用异羟基洋地黄毒苷配基(Digoxigenin,(Dig)-11-dUTP),以随机引物法标记含有恶性疟原虫(P.f.)DNA的重组质粒片段(酶切克隆pPF14),制成pPF14-F-Dig探针。用此探针,以斑点杂交试验检测提纯的P.f.DNA及海南地区疟疾病人。结果显示,pPF14-F-Dig探针至少可检出40pg的P.f.DNA和低至0.005％原虫血症。38例P.f.病人中,检出阳性33例。3例恶性疟原虫和间日疟原虫混合感染者中,2例阳性。4例间日疟病人中,阴性3例,可疑1例。21例正常人血皆为阴性。
Recombinant plasmids containing Plasmodium falciparum (Pf) DNA (digested clone pPF14) were labeled with Digoxigenin (Dig) -11-dUTP by random primer to make pPF14-F -Dig probe. Using this probe, purified P.f.DNA was detected by dot blot hybridization assay and malaria patients in Hainan. The results showed that the pPF14-F-Dig probe could detect at least 40 pg of P.f. DNA and as little as 0.005% of protozoosis. Of the 38 patients with P.f., 33 were positive. Of 3 cases of Plasmodium falciparum and Plasmodium vivax mixed infections, 2 were positive. Among 4 cases of Plasmodium falciparum, 3 were negative and 1 was suspicious. 21 cases of normal blood were negative.
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