【摘 要】
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利用叶绿体基因组在进化过程中高度保守的特点，根据烟草、水稻和玉米叶绿体基因组全序列资料，设计合成引物，PCR扩增并克隆了油菜叶绿体两个重要的功能基因rbcL和atpB（GenBank登录
【机 构】
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中国农业科学院生物技术研究所,中国科学院植物研究所,;
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利用叶绿体基因组在进化过程中高度保守的特点，根据烟草、水稻和玉米叶绿体基因组全序列资料，设计合成引物，PCR扩增并克隆了油菜叶绿体两个重要的功能基因rbcL和atpB（GenBank登录号分别为AF267640和AF267641），并以此作为定点整合外源基因的同源重组片段。以来自叶绿体的强启动子PpsbA和Prrn等驱动PHB合成途径中3个关键酶基因phbA、phbB和phbC，分别构建表达盒，并将它们按照其在原始菌株中的自然转录顺序phbC-phbA-phbB相串联，最后连同选择标记基因aadA表达盒一起，克隆到油菜叶绿体同源片段中，构建成phb基因定点整合载体pRCABZ和pRCABF。酶切及Southern杂交结果证明所构建的转化载体符合预期设计。叶绿体转化及后续工作目前正在进行之中。
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