目的 探讨蛋白激酶C(PKC)α与浅表膀胱癌细胞分化及内源性耐药的关系.方法采用蛋白印迹法检测76例临床标本(浅表膀胱癌及正常组织)中PKCα的表达水平,对所有患者行标准化疗后随访4～24个月,分析PKCα表达及活化与复发的关系.应用人浅表膀胱癌细胞系RT4细胞,建立能够稳定表达PKCα-绿色荧光蛋白(GFP)的人膀胱癌细胞系RT4/PKCα-GFP.用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)测定RT4/PKCα-GFP和亲代细胞对阿霉素的敏感性.分别检测PKCα激活和抑制状态下RT4/PKCα-GFP对阿霉素敏感性的差异.结果在癌组织中,PKCα总体表达水平和胞膜、胞浆中表达水平的比值(M/C值),均显著高于正常组织(癌组织为正常组织的2.2倍,t=1.98,P<0.05;M/C值癌组织为0.84±0.12,正常组织为0.23±0.11,t=2.62,P<0.01).随着肿瘤分级的升高,胞膜中PKCα的相对表达的水平显著升高(P<0.01),胞浆中的相对表达水平显著下降(P<0.01),PKCα的M/C值显著升高(P<0.01),总体PKCα相对表达水平显著升高(P<0.01).70例获随访,共复发38例.多因素分析表明,高PKCα M/C值是影响化疗后近期复发的独立预后因素(相对危险度3.98,95%可信区间 1.22～5.68,P=0.03).转染PKCα基因后,RT4细胞对阿霉素的耐药性增强 (耐药指数6.97, t=3.24, P<0.01).PKCα的激活显著提高了RT4细胞的耐药性(耐药指数148.11, t=5.18, P<0.001),而抑制PKCα活性则使耐药指数降至1.6(t=1.29, P>0.05).结论 PKCα的异常活化和表达上调与浅表膀胱癌的分化及对阿霉素的内源性耐药密切相关。