柯萨奇病毒B组3型中国分离株VP1基因真核表达系统的克隆

来源 :中华地方病学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：clxzzx

【摘要】

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【作者】

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田野钟照华赵铁强黄建林安毅唐伟沈景霞钟学宽孟繁超黄永麟鲁凤民叶鸿瑁

【机构】

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哈尔滨医科大学第一临床医学院心内科,150001,哈尔滨医科大学基础医学院,150086,哈尔滨工业大学,150001,北京医科大学第三临床医学院,100083

【出处】

：

中华地方病学杂志

【发表日期】

：

1999年18期

【关键词】

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VP1基因真核表达系统柯萨奇病毒分离株克隆法重组子免疫保护作用机体免疫应答酶切消化微生物学教研室

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目的探讨构建柯萨奇病毒B组3型(CVB3)基因疫苗的可行性.方法应用逆转录PCR技术扩增CVB3中国分离株VP1基因,通过TA克隆法构建pCR2.1-CVB3VP1,将CVB3VP1亚克隆至真核表达载体pCEP4,构建真核表达系统pCEP4-CVB3VP1,并进行酶切和测序鉴定.结果发现CVB3的中国分离株与Nancy株的VP1基因基本一致,均编码293个氨基酸,其中有59处核苷酸存在变异,但仅改变了10处氨基酸编码,证实克隆的片段为CVB3VP1基因,表达载体为pCEP4.结论实验成功地构建了CVB3中国分离株的真核表达系统pCEP4-CVB3VP1,为CVB3基因疫苗的研究奠定了基础.

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