论文部分内容阅读
目的
观察骨髓间质干细胞移植治疗心肌梗死时对myocardin相关转录因子–A(MRTF–A)的影响及MRTF–A对凋亡相关基因bcl–2表达的调控作用。
方法采用随机数字表法将30只大鼠分为假手术组、心肌梗死组和干细胞移植组，每组10只。假手术组大鼠实行手术但不结扎冠状动脉，心肌梗死组结扎冠状动脉建立心肌梗死模型，干细胞移植组心肌梗死模型形成后移植骨髓间质干细胞。术后1周，采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡、激光共聚焦法和Western blot法检测bcl–2及MRTF–A表达。体外培养心肌细胞并转染MRTF–A表达质粒或共转染MRTF–A表达质粒及bcl–2报告基因质粒或其突变体，经Western blot法及荧光素酶法确定bcl–2蛋白表达及转录活性。
结果假手术组、心肌梗死组和干细胞移植组的心肌凋亡细胞分别为(4.05±1.56)%、(62.38±8.41)%和(22.36±6.17)%，心肌梗死组明显高于假手术组(P<0.05)和干细胞移植组(P<0.05)；心肌梗死组的MRTF–A及bcl–2蛋白表达明显低于假手术组，而干细胞移植组则高于心肌梗死组(P均<0.05)；在体外培养的原代心肌细胞中，MRTF–A转染量为0.2、0.4和0.6 μg时，bcl–2的蛋白表达及转录活性均明显高于MRTF–A转染量为0 μg时(P<0.01)；将bcl–2启动子上的CArG Box突变后，bcl–2的转录活性的差异无统计学意义。
结论骨髓间质干细胞移植能有效抑制心肌梗死诱导的大鼠心肌细胞调亡，其机制可能与骨髓间质干细胞移植后心肌细胞MRTF–A表达增高并继而调控抗凋亡基因bcl–2转录表达有关。