动脉粥样硬化患者血清微小RNA-181b的异常表达及其作用

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目的

观察动脉粥样硬化患者血清中微小RNA-181b(miR-181b)的表达情况,以及miR-181b对人血管内皮细胞核内转移蛋白-α3(Importin-α3)表达和血管平滑肌细胞增殖、迁移的影响,探讨miR-181b在动脉粥样硬化发生发展过程中的作用。

方法

选取2012年11月至2013年6月在上海交通大学医学院附属第三人民医院就诊的经外周动脉超声检查诊断为动脉粥样斑块形成的50例患者为动脉粥样硬化组,平均年龄(78.1±8.9)岁;同时入选50名健康成人为对照组,平均年龄(72.5±10.7)岁。采集患者外周血,采用带茎环结构的实时定量PCR方法检测其血清中miR-181b的表达水平;经Targetscan和Pitar靶基因预测数据库预测核质转运受体Importin-α3为miR-181b的靶基因,体外实验采用Western blot检测miR-181b对人血管内皮细胞Importin-α3表达的影响;采用双荧光素酶报告基因检测证实Importin-α3为miR-181b的直接靶基因;CCK8法和Transwell小室试验检测miR-181b对人血管平滑肌细胞增殖、迁移能力的影响。

结果

与正常组比较,动脉粥样硬化组血清中miR-181b的表达水平较低(31.69±0.96比82.28±5.95,P<0.05);Western-blot和双荧光素酶报告实验证实Importin-α3为miR-181b的直接靶基因;增高miR-181b的表达使得人血管平滑肌细胞的增殖(1.57±0.18比2.66±0.16,P<0.05)和迁移能力(8.7±1.1比21.4±2.3,P<0.05)明显降低;抑制miR-181b的表达则获得相反的效果(增殖:2.88±0.09比2.04±0.11,P<0.05;迁移:15.2±1.5比8.4±1.3,P<0.05)。

结论

动脉粥样硬化患者血清中miR-181b表达水平低于正常人,miR-181b可能通过阻断血管内皮细胞中核因子-κB信号途径和通过抑制血管平滑肌细胞的增殖和迁移起到抗动脉粥样硬化的作用。

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