【摘 要】
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目的在葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的实验性结肠炎小鼠中探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因敲除(TRAIL－/－)对结肠炎症反应及调节性T细胞(Treg)的影响。方法选取C57BL/6品系的TRAIL－/－小鼠和野生型(WT)小鼠，随机分为WT对照组、WT结肠炎组，TRAIL－/－对照组和TRAIL－/－结肠炎组，每组各10只。口服3.5%的DSS诱导实验性结肠炎模型并评估结肠炎症程度
【机 构】
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目的在葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的实验性结肠炎小鼠中探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因敲除(TRAIL－/－)对结肠炎症反应及调节性T细胞(Treg)的影响。
方法选取C57BL/6品系的TRAIL－/－小鼠和野生型(WT)小鼠，随机分为WT对照组、WT结肠炎组，TRAIL－/－对照组和TRAIL－/－结肠炎组，每组各10只。口服3.5%的DSS诱导实验性结肠炎模型并评估结肠炎症程度。收集外周血单个核细胞(PBMCs)和肠系膜淋巴结(MLNs)，经流式细胞术检测Treg细胞占CD4＋T细胞的比例，采用实时荧光定量PCR法检测Treg细胞相关转录因子(Foxp3)和细胞因子(IL-10)的mRNA表达水平，分别采用蛋白质印迹法和酶联免疫吸附试验检测Foxp3和IL-10蛋白表达水平。
结果与WT对照组相比，WT结肠炎小鼠PBMCs中Treg细胞比例显著降低[(1.85±0.38)%比(3.12±0.69)%，P<0.05]，而MLNs中Treg细胞比例显著增高[ (11.79±1.18)%比(6.24±1.04)%，P<0.05]。与WT结肠炎小鼠相比，TRAIL－/－结肠炎小鼠结肠炎症更为严重，PBMCs中Treg细胞比例显著增高[(3.15±0.64)%比(1.85±0.38)%，P<0.05]，而MLNs中Treg细胞比例显著降低[(9.80±0.50)%比(11.79±1.18)%，P<0.05]。WT结肠炎小鼠PBMCs中Foxp3、IL-10的mRNA和蛋白表达水平均显著低于WT对照组小鼠[Foxp3 mRNA：0.48±0.21比1.06±0.31，IL-10 mRNA：0.23±0.07比1.22±0.38；Foxp3蛋白：0.68±0.12比1，IL-10蛋白：(4.91 ±0.72)pg/ml比(21.86±2.40)pg/ml，P均<0.05]，而MLNs中Foxp3、IL-10的mRNA和蛋白表达水平均显著高于WT对照组小鼠[Foxp3 mRNA：3.71±0.49比1.03±0.15，IL-10 mRNA：11.98±6.10比1.01±0.31；Foxp3蛋白：1.60±0.03比1，IL-10蛋白：(1 260.00±18.02)pg/ml比(1 184.00 ± 38.62)pg/ml，P均<0.05]。与WT结肠炎小鼠相比，TRAIL－/－结肠炎小鼠PBMCs中Foxp3、IL-10的mRNA及蛋白表达水平显著增高[Foxp3 mRNA：1.80±0.49比0.48±0.21，IL-10 mRNA：1.67±0.99比0.23±0.07；Foxp3蛋白：1.10±0.01比0.68±0.12，IL-10蛋白：(31.33±25.02)pg/ml比(4.58±3.73)pg/ml，P均<0.05]，而MLNs中Foxp3、IL-10的mRNA及蛋白表达水平显著降低[Foxp3 mRNA：0.49±0.21比3.71±0.49，IL-10 mRNA：2.80±1.82比11.98±6.10；Foxp3蛋白：1.21±0.12比1.60±0.03，IL-10蛋白：(1 158.00±26.48)pg/ml比(1 190.00±37.19) pg/ml，P均<0.05]。
结论TRAIL基因敲除可能引起外周血及肠系膜淋巴结中Treg细胞数量改变，从而导致小鼠结肠炎加重。
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