【摘 要】
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目的探讨自噬在大鼠急性脊髓损伤(ASCI)肺组织中的变化及可能机制。方法63只雌性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组(21只)和脊髓损伤组(42只)。采用改良Allen法以10×25 g·mm能量于T10节段打击脊髓,制备ASCI模型。于伤后6,12,24,48,72 h、1,2周取材。通过HE染色和TUNEL法观察肺组织损伤、细胞凋亡情况。采用Western blot法及免疫荧光检测肺组织的自噬
【机 构】
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400014 重庆,儿童发育疾病研究教育部重点实验室,儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地,重庆市干细胞治疗工程技术研究中心,重庆医科大学附属儿童医院骨二科,400014 重庆,儿童发育疾病研究教育部
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目的探讨自噬在大鼠急性脊髓损伤(ASCI)肺组织中的变化及可能机制。
方法63只雌性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组(21只)和脊髓损伤组(42只)。采用改良Allen法以10×25 g·mm能量于T10节段打击脊髓,制备ASCI模型。于伤后6,12,24,48,72 h、1,2周取材。通过HE染色和TUNEL法观察肺组织损伤、细胞凋亡情况。采用Western blot法及免疫荧光检测肺组织的自噬变化及LC3-Ⅱ、P62、Beclin-1、白细胞介素(IL)-17A、Bcl-2表达水平。
结果假手术组肺泡结构正常,无炎症及出血。脊髓损伤组于伤后12 h肺组织出现轻微损伤;肺泡间质增宽、炎性浸润、出血、肺泡塌陷等损伤于伤后24~72 h逐渐出现并加重。脊髓损伤组伤后24,72 h和1周凋亡细胞数分别为(551.22±135.94)个/视野、(905.11±92.64)个/视野和(141.78±30.86)个/视野,24 h和72 h较假手术组增多(P<0.05)。脊髓损伤组LC3-Ⅱ相对表达量在伤后24~72 h较假手术组增高(P<0.05)。与假手术组比较,脊髓损伤组P62相对表达量在伤后24~72 h上调(P<0.05);Beclin-1相对表达量伤后24 h升高(P<0.05),48~72 h出现下降(P<0.05);IL-17A相对表达量在伤后24~48 h升高(P<0.05);Bcl-2相对表达量伤后24~72 h升高(P<0.05)。
结论大鼠ASCI后肺组织自噬小体形成增多并出现蓄积,其发生可能与IL-17A通过上调Bcl-2从而增加Beclin-1与Bcl-2的相互作用,最终导致自噬被抑制。
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