分别采用脂肪酶1、脂肪酶2、脂肪酶Lipozyme TL IM和Novozyme435四种脂肪酶在叔丁醇溶剂中催化大豆油进行甘油解反应，以单甘酯含量为衡量指标，研究四种脂肪酶的催化效果。结果表明Novozyme435效果最好，单甘酯含量为25.7%。以大豆油为原料，使用Novozyme435对大豆油进行甘油解反应制备单甘酯。通过单因素试验及正交试验法得到最佳工艺条件为：温度55℃，加水量1%（油重），底物比例n（甘油）∶n（豆油）为3：1，酶量3%（油重）。在此条件下产品单甘酯含量为43.7%。分别使用高碘酸滴定法和棒状薄层色谱法对单甘酯含量进行测定，估算出产物单甘酯中包含3.8%的2-单甘酯。以大豆油为原料，在超临界CO₂条件下脂肪酶催化大豆油甘油解制备单甘酯。压力、含水量、底物比例、温度对超临界CO₂条件下脂肪酶催化甘油解反应制备单甘酯的影响趋势明显。在压力26MPa、含水量5%（甘油重）、大豆油：甘油1：2（摩尔比）、温度60℃条件下单甘酯含量为26.9%。与不通入CO₂而其它条件相同的反应进行对比，看出超临界CO₂对反应有明显促进作用。以大豆油为原料，在超临界CO₂条件下高温催化大豆油甘油解制备单甘酯，通过单因素试验和响应面试验法优化工艺，得出最佳工艺条件：温度248℃，压力为13MPa，时间为3.8h，加水量为15.6%（甘油重）。在此条件下得到产物单甘酯含量62.4%，产率68.1%。超临界CO₂条件下高温催化大豆油甘油解制备单甘酯所得的单甘酯含量60.0%，经过两次分子蒸馏，得到含量92.1%的单甘酯，收率81.0%。分子蒸馏条件：一次蒸馏温度110℃、压力10⁴0Pa，刮板转速20r/min，下料速度2mL/min；二次蒸馏温度150℃、压力10⁴0Pa，刮板转速20r/min,下料速度2mL/min。使用回收的甘油和二次分子蒸馏回收的重相在温度250℃，压力20MPa，时间4h，加水量5%（甘油重），甘油：大豆油25：1（摩尔比）超临界CO₂条件下催化大豆油甘油解反应，分别得到52.8%和49.3%的单甘酯；分别对花生油、44度分提棕榈油和菜籽油进行超临界CO₂条件下甘油解反应试验。分别得到单甘酯的含量为50.1%，52.3%和48.6%。