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目的:观察病毒性心肌炎(Vital Myocarditis,VMC)小鼠心肌骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)的表达情况,探讨OPN在病毒性心肌炎中表达的意义。
方法:以柯萨奇病毒B3(Coxsackie virus B3,CVB3)感染BALB/C小鼠(n=32)建立病毒性心肌炎动物模型,同时设正常组(n=32),取心肌组织病理切片行HE染色及Masson染色,并计算病理积分及心肌胶原纤维容积分数(CVF)、RT-PCR及ELJSA法检测OPN表达、RT-PCR检测Ⅰ型胶原(ColⅠ)含量并做相关性分析。
结果:⑴柯萨奇病毒B3可成功建立BALB/C小鼠病毒性心肌炎动物模型。⑵心肌组织病理学改变:VMC早期心肌细胞坏死,炎症反应明显,恢复期炎症细胞逐渐消失,胶原明显增生。⑶心肌组织病理积分:病毒组各时间点心肌病理积分明显高于对照组(P<0.05),以第7天增高最为明显,第14天后逐渐下降,第28天增高幅度最低。⑷RT-PCR检测心肌组织OPN mRNA表达:对照组及病毒组小鼠心肌中均有OPN mRNA表达,病毒组小鼠心肌组织中OPN mRNA表达量于第7天最高,第14天后表达开始下降,第28天时表达量较低,但均高于对照组小鼠心肌组织中的含量(P<0.05)。⑸Elisa法检测心肌组织OPN表达:病毒组小鼠OPN浓度于第7天最高,第14天后逐渐下降,第28天降至最低,但均高于对照组(P>0.05)。⑹心肌纤维容积分数(CVF)结果显示:病毒组第7天~第14天CVF与对照组相比无明显差异(P>0.05);病毒组第21天、第28天CVF与对照组、病毒组第7天、第14天组比较有明显差异(P<0.05)。⑺RT-PCR检测心肌组织Ⅰ型胶原mRNA(ColⅠ mRNA)表达:病毒组第7天、第14天心肌ColⅠ表达较弱,与同期对照组相比无明显差异(P>0.05),第14天后开始增强,第28天最高,第21天、第28天ColⅠ mRNA/GAPDH光密度值与对照组、第7天、第14天比较有明显差异(P<0.05)。⑻相关性分析:OPN mRNA表达与心肌病理积分做相关性分析,R2=0.8877,两者呈正相关;ColⅠ mRNA与CVF做相关性分析,R2=0.9411,两者呈正相关;心肌ColⅠ mRNA与OPN mRNA表达相关性分析,R2=0.3322,两者无相关性。
结论:OPN可能参与VMC急性期的炎症反应,且在恢复期可能有促胶原合成的作用。