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目的:山豆根在中医临床上广泛用于治疗咽喉肿痛和牙龈肿痛等疾病，其含有以苦参碱(matrine，MT)、氧化苦参碱(oxymatrine，OMT)和金雀花碱(cytisine，CYT)为主的多种有效的活性生物碱成分。本课题旨在通过急性毒性试验、蓄积毒性试验、耐受性试验、亚慢性毒性试验，四氯化碳(carbon tetrachloride，CCl4)所致肝损伤试验，以及MT、OMT和CYT对于丁酰胆碱酯酶和乙酰胆碱酯的酶抑制试验研究山豆根所致肝毒性并试图寻找出除丙氨酸氨基转移酶(alanineaminotransferase，ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase，AST)以外的潜在补充血清标志物，同时通过正常的小鼠肝细胞(AML12细胞)的体外毒性试验研究MT、OMT、CYT、MT+OMT和MT+OMT+CYT对体外细胞的毒性作用。 方法:用HPLC法同时检测山豆根中MT、OMT和CYT的含量。在急性毒性试验中，设6组每组10只动物单次经口给予2.4，3.2，4.2，5.6，7.5 g/kg的山豆根，对照组给予超纯水，在给药后的14天内进行观察，同时记录任何与给药相关的动物的毒性反应和死亡情况，并计算LD50值;再另设置5组每组10只动物分别单次经口给予4.3 g/kg和5.6 g/kg山豆根，单次腹腔注射0.1％和0.2％的CCl4溶液，对照组给予超纯水。在蓄积毒性试验中，设2组每组20只动物，试验组动物经口灌胃给予0.1LD50（第1～4天）、0.15LD50（第5～8天）、0.23LD50（第9～12天）、0.34LD50（第13～16天）和0.51LD50（第17～20天）山豆根，对照组给予超纯水。耐受性试验则是在第21天单次经口灌胃给予蓄积毒性试验中试验组的10只动物4.3 g/kg山豆根，另10只动物5.6 g/kg山豆根。在亚慢性毒性试验中，设4组每组6只动物，连续90天每天经口灌胃给予0.25、1.0和2.5 g/kg山豆根，对照组给予超纯水。体内动物实验结束后，分析血清生化指标和进行组织病理学检查来评价急性毒性试验、CCl4所致肝损伤试验、蓄积毒性试验、耐受性试验和亚慢性毒性试验。同时，进行MT、OMT和CYT对于丁酰胆碱酯酶和乙酰胆碱酯的酶抑制试验。在体外细胞试验中，用CCK8法评价MT、OMT、CYT、MT+OMT和MT+OMT+CYT对AML12细胞存活率的影响，并计算各供试品的IC50值;根据各供试品的IC50值，设定各供试品相应的低、中、高3个试验浓度，并在加药3h、6h、12h和24h后，进行MT、OMT、CYT、MT+OMT和MT+OMT+CYT对AML12细胞毒性作用的评价。 结果:山豆根中CYT、MT和OMT的含量分别为5.63 mg/g、7.63 mg/g和16.20mg/g，计算得到MT和OMT的含量总和为山豆根生药材的0.953％，符合《中华人民共和国药典》的标准。急性毒性试验结果表明，动物的死亡情况与山豆根给药剂量之间呈正相关，并计算得出LD50=4.3 g/kg。CCl4所致肝损伤试验结果表明，血清ALT和AST的变化呈剂量依赖性，血清胆碱酯酶(cholinesterase，CHE)也与剂量呈正相关，同时受试动物的肝脏可见不同程度的小叶中心性肝细胞坏死并且病变也随着剂量的升高而逐渐加重。在耐受性试验中，血清ALT、AST和CHE水平均随着山豆根的给药剂量的递增而升高，同时受试动物的肝脏可见不同程度的小叶中心性肝细胞肥大和小叶周围性肝细胞微空泡化且病变程度也与山豆根的给药剂量呈正相关。在亚慢性毒性试验中，发现受试动物的肝脏有不同程度的小叶中心性肝细胞肥大，尽管由于给药相关的受试动物体重减轻，导致试验组动物与对照组动物相比，血清ALT和AST水平随剂量升高有下降趋势，但血清CHE水平和受试动物肝脏病变的程度均与山豆根给药剂量呈正相关，并且随着血清CHE的升高受试动物肝病变程度也逐渐加重。酶抑制试验结果也表明，MT、OMT和CYT对丁酰胆碱酯酶和乙酰胆碱酯酶有抑制作用，提示体内试验中血清CHE的升高与山豆根所致肝毒性相关，而非药物直接作用所致。CYT、MT、MT+OMT和MT+OMT+CYT对于AML12细胞的IC50值分别为15.17mmol/L、18.98 mmol/L、16.51 mmol/L和9.33 mmol/L。OMT对AML12细胞基本无毒性。AML12细胞毒性试验的结果表明，在同一时间点，MT、MT+OMT和MT+OMT+CYT所致AML12细胞上清液中ALT、AST和LDH水平的变化呈剂量依赖性，并且CYT、MT、MT+OMT和MT+OMT+CYT对AML12细胞毒作用的高峰可能分别在加药后12h、3h、6h和3h。 结论:本研究结果提示山豆根可致肝毒性，并且血清CHE可能是肝毒性损伤的又一潜在补充血清标志物。CYT、MT、MT+OMT和MT+OMT+CYT对AML12细胞有一定的毒性作用。