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背景:有统计数据显示,70％的帕金森病(Parkinson’s disease,PD)病人存在胃动力异常,88％的PD病人有胃固体食物排空延迟症状[1,2],但其发病机制尚不清楚。5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)是胃肠道重要的神经递质和旁分泌分子,通过不同的5-HT受体调节胃肠道动力和分泌功能。其中5-HT3和5-HT4受体(5-HT3/4受体)在胃肠道中的分布较为广泛:胃肠神经元、胃肠平滑肌细胞、胃肠上皮细胞中均有分布[3],5-HT3受体介导胃肠反射,5-HT4受体介导蠕动反射。5-HT4受体可促进胆碱能系统的神经递质释放[4,5],从而导致胃肠道平滑肌收缩,使胃排空加快[6]；而多巴胺(dopamine,DA)可以抑制胃动力,增加胃粘膜血流量,从而抑制溃疡的形成。临床研究发现在PD患者中,内源性DA含量变化,胃动力会随之发生变化。在多巴胺转运体(dopamine tronsporter,DAT)敲除的小鼠体内,发现5-HT系统改变[7],而在5-HT转运体(serotonin tronsporter,SERT)敲除的小鼠体内,DA系统发生改变[8]。这些研究结果表明5-HT和DA之间可能存在相互联系及相互调节作用。PD病人的病理改变是中枢黑质多巴胺能神经元受损,6-羟多巴(6-hydroxydopamine,6-OHDA)处理模型大鼠(模型鼠)病理改变与其相同。本组的前期研究发现模型鼠中枢黑质多巴胺能神经元后可引起外周胃肠道DA标记物酪氨酸羟化酶(TH)和多巴胺转运体(DAT)含量升高。本实验中我们深入探讨模型鼠胃动力以及相关的D1和D2受体(D1和D2受体,D1/2受体)和5-HT3/4受体表达的变化。
目的和方法:目的:研究DA1/2受体和5-HT3/4受体在内源性DA调节胃动力中的作用,探讨PD胃轻瘫发病的可能机制。方法:采用6-OHDA损毁大鼠中枢黑质多巴胺能神经元,建立此模型；采用实时荧光聚合酶链反应(Real-time PCR)法和蛋白免疫印记法(Western Blot),检测DA1/2受体和5-HT3/4受体在模型鼠胃体的表达；采用Power lab生物信号采集系统记录在体和离体大鼠胃体纵行肌的收缩活动。
实验结论:
通过本研究,我们发现:
1)基础状态下,模型鼠离体胃体纵行肌的收缩强度明显弱于对照大鼠。加入5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)后,模型鼠肌条的收缩强度上升幅度明显小于正常对照组；Real-time PCR结果显示模型鼠胃体5-HT3/4受体的基因表达水平显著高于正常大鼠；Western Blot结果显示模型鼠胃体5-HT4受体蛋白水平下调,5-HT3受体蛋白水平变化不明显。损毁中枢黑质多巴胺能神经元可引起外周胃肠道内源性DA含量升高,胃动力减弱,5-HT4受体蛋白水平下调。模型鼠胃动力减弱可能与5-HT4受体蛋白水平下调有关。
2)基础状态下,模型鼠离体胃体纵行肌的收缩强度明显弱于对照大鼠。加入DA后模型鼠和对照组肌条收缩张力明显下降,但是两者间张力下降程度无明显大小关系。Real-time PCR结果显示模型鼠胃体D1/2受体的基因表达水平显著高于正常大鼠。Western Blot结果显示模型鼠胃体D2受体蛋白水平上调,D1受体蛋白水平变化不明显。损毁中枢黑质多巴胺能神经元可引起外周胃肠道内源性DA含量升高,胃动力减弱,D2受体蛋白水平上调,模型鼠胃动力减弱可能与D2受体蛋白水平上调有关。