“柴芩”注射液的研制及其初步药效学研究

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cet1979
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本研究针对兽医临床上多见的以发热,低温或寒热往来,伴随着食欲减退或者废绝,精神沉郁为症状的不食综合症,结合中兽医辩证论治的观点,通过建立少阳证病理模型,对和法的经典方剂小柴胡汤进行拆方研究,制备“柴芩”中药注射液,并对该制剂的质量标准以及药效学展开了研究,其结果如下:1、以40、80、160μg/kg剂量腹腔注射大肠杆菌内毒素(Lipopolysaccharides, LPS)后,大鼠均表现出较为明显的三相热。其中,80μg/kg剂量的发热幅度最大。2、80μg/kg的LPS造模后,除明显的三相热外,大鼠的胃残留率明显增加,小肠推进率降低,说明少阳证大鼠的胃肠功能减弱,与伤寒论中描述的小柴胡证中“嘿嘿不欲饮食”之症相符。白细胞数在体温降低的同时升高,淋巴细胞数升高,一定程度上反映了少阳证中正邪抗争的状态。血清谷丙转氨酶(ALT),碱性磷酸酶(AKP),总胆红素(TBil)和胆汁酸(TBA)升高,印证了少阳证的病位在肝胆,与“胸胁苦满”之症相符。经小柴胡汤反证后,各指标除TBil和TBA变化不明显外,均与正常对照组差异不显著(P<0.05),淋巴细胞和白细胞数增多。3、8组拆方对少阳证的药效研究表明,各组均能降低少阳证大鼠血清中较高的ALT和AKP,除柴胡、黄芩和生姜组降温作用相对全方组较差外,其他各拆方组均能有效降低少阳证大鼠的发热,与全方组无显著性差异(P<0.05)。说明柴胡和黄芩组合能在一定程度上达到与小柴胡汤相近的药效,故将该组方定为注射剂的处方。4、高效液相色谱法检测“柴芩”注射液中柴胡皂甙A和黄芩苷的含量。黄芩苷检测的色谱条件为:色谱柱:Hypersil ODS,5μm,4.6×250mm;检测器:紫外检测器;流动相:甲醇:水:磷酸(45:55:0.2,V/V);流速:1mL/min;柱温:35℃;UV检测波长:278nm;进样量:10μL。精密量取样品溶液1mL置于100mL容量瓶中,用流动相稀释至刻度,混合均匀,0.45μm的滤膜过滤,取10μL进样,对照标准曲线,求出含量。柴胡皂甙A检测的色谱条件为:色谱柱:Hypersil ODS,5μm,4.6×250mm;检测器:紫外检测器;流动相:甲醇:水(75:25,V/V);流速:1mL/min;柱温:35℃;UV检测波长:208nm;进样量:10μL。检测方法为:样品溶液经0.45μm的滤膜过滤,取10μL进样检测,对照标准曲线,求出含量。该方法具有稳定、可靠、重现性高、回收率高、结果准确等特点,可作为该制剂含量检测的方法。5、“柴芩”注射液以1.25mL/kg、0.625mL/kg,0.313mL/kg给予少阳证模型大鼠后,其体温、胃肠动力,血清ALT和AKP均降低,与空白对照组无显著性差异(P<0.05)。表明“柴芩”注射液对大鼠少阳证有效。
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