宫颈癌FANCF基因甲基化与转录表达的关系

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目的:本研究通过检测宫颈癌(CC)患者癌组织、正常对照组织和相应血浆中范可尼贫血相关基因F(FANCF)基因甲基化状况及其表达,分析FANCF基因甲基化导致基因表达异常与宫颈癌发生发展之间的关系,以探讨宫颈癌组织及外周血浆中FANCF基因异常甲基化的状况及其表达在宫颈癌分子诊断及临床治疗的应用价值。  方法:将提取的DNA经过重亚硫酸钠修饰后,用甲基化特异性 PCR(MSP)技术检测癌组织、正常对照组织和相应血浆中的FANCF基因的甲基化状况。用荧光定量PCR(FQ-PCR)检测基因mRNA在宫颈癌组织、正常对照组织及用去甲基化试剂5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理前后SiHa细胞株中的表达。并分析FANCF基因甲基化状况及其表达水平与宫颈癌临床病理特征之间的关系。  结果:FANCF基因在宫颈癌患者组织及相对应血浆中表现为高甲基化,甲基化率分别为39%(16/41)、24.4%(10/41),正常对照宫颈组织未检测出甲基化。癌组织、血浆中甲基化的改变与正常对照比较有统计学意义。FANCF基因甲基化水平与宫颈癌分化程度、患者年龄有统计学意义,而与肿瘤大小、分期无统计学意义。正常宫颈组织中 FANCF基因均表达(相对定量值0.884±0.040),41例癌组织中有24例基因表达降低或缺失(相对定量值0.354±0.304),两者比较有统计学意义,16例甲基化癌组织基因表达相对定量值为0.072±0.103,25例非甲基化癌组织基因表达相对定量值为0.534±0.247,两者比较有统计学意义。宫颈癌细胞系SiHaFANCF基因表达表达降低,去甲基化处理SiHa后,该基因表达明显升高。  结论:宫颈癌中存在有FANCF基因的高甲基化,FANCF基因甲基化和mRNA表达呈负相关,且高甲基化所导致的基因表达异常可能在宫颈癌的发生、发展中起到一定的作用,其甲基化的检测在宫颈癌的早期诊断中有一定的应用价值;逆转甲基化药物应用可能对抑制及治疗宫颈癌有一定的临床应用价值;为临床早期诊断及治疗提供一定的理论基础。
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